Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CDC25A per WB, ELISA - P30304

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CDC25A

• CDC25A (fosfatasi 1 induttore della fase M, nota anche come Fosfatasi a doppia specificità Cdc25A) è un regolatore chiave della progressione del ciclo cellulare.
• Agisce come induttore dose-dipendente della progressione mitotica attraverso la sua attività tirosina fosfatasi. Riferimenti correlati: PMID:12676925 PMID:14559997 PMID:1836978
• CDC25A defosforila direttamente e attiva CDK1, una chinasi mitotica principale. Riferimenti correlati: PMID:20360007
• Defosforila anche CDK2 in complesso con la ciclina E, contribuendo alla regolazione della transizione G1/S. Riferimenti correlati: PMID:20360007
• La proteina subisce splicing alternativo, generando più isoforme con funzioni potenzialmente distinte.
• CDC25A è una fosfoproteina ed è regolata dalla coniugazione con ubiquitina (coniugazione Ubl), che la indirizza alla degradazione proteasomiale durante i checkpoint del danno del DNA.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blot, il peso molecolare previsto delle isoforme di CDC25A è 54-59 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di controllo positivo da linee cellulari umane, murine o ratte e ottimizzare le condizioni di trasferimento per una chiara risoluzione delle bande.
• È necessario testare diverse concentrazioni di anticorpo primario (es. 0,5-2 µg/mL) per determinare il rapporto segnale-rumore ottimale sia nelle impostazioni di WB che di ELISA.
• Convalidare la reattività crociata in campioni di topo e ratto utilizzando estratti di tessuti o cellule appropriati per confermare le prestazioni specifiche per specie.
• Per le applicazioni ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un anticorpo di rilevamento corrispondente può aumentare la sensibilità; eseguire curve di calibrazione con la proteina ricombinante bersaglio per valutare la linearità del test.

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