Anticorpo policlonale di coniglio anti-CDC25C per WB, ELISA - P30307

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDC25C

• CDC25C (fosfatasi 3 induttrice della fase M) è una fosfatasi a doppia specificità che svolge un ruolo fondamentale nella regolazione del ciclo cellulare, in particolare nella transizione G2/M.
• Funziona come induttore dose-dipendente nel controllo mitotico; quando viene fosforilata, induce potentemente le cellule in fase G2 a entrare in profase defosforilando e attivando direttamente la chinasi CDK1. Riferimenti correlati: PMID:8119945
• La proteina è localizzata prevalentemente nel nucleo, in accordo con il suo ruolo nella regolazione degli eventi nucleari della mitosi.
• CDC25C è soggetta a fosforilazione regolatoria e la sua attività viene finemente modulata durante il ciclo cellulare; inoltre, viene acetilata ed è sottoposta a splicing alternativo.
• In quanto membro della famiglia delle fosfatasi proteiche, appartiene alla più ampia classe delle idrolasi ed è coinvolta nelle interazioni ospite-virus, sebbene i meccanismi dettagliati debbano ancora essere completamente chiariti.
• L'isoforma canonica ha un peso molecolare previsto di circa 53 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 20–130 della CDC25C umana, una regione che può essere conservata tra le specie; pertanto, in base ai dati del fornitore, si prevede che l'anticorpo reagisca anche con CDC25C di topo e ratto. Tuttavia, è necessario verificare l'allineamento delle sequenze per il modello specifico utilizzato.
• Per il Western blot (WB), si prevede una banda corrispondente alla proteina di circa 53 kDa; tuttavia, gli eventi di fosforilazione possono causare lievi variazioni della mobilità. Si consiglia di utilizzare inibitori delle fosfatasi durante la preparazione dei campioni per preservare gli stati di modificazione nativi.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per rilevare CDC25C ricombinante o endogena; per la quantificazione, si raccomanda di associarlo a un sistema di rilevazione adeguato e a una curva standard.
• Essendo un anticorpo policlonale, può esistere una variabilità tra i diversi lotti; è consigliabile prevalidare ogni nuovo lotto nel proprio sistema di analisi.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati, come lisati con sovraespressione di CDC25C o campioni sottoposti a knockdown, per confermare la specificità.

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