Anticorpo monoclonale anti-CDC27 per WB, ELISA - P30260

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDC27

• CDC27, noto anche come APC3 o ANAPC3, è una subunità centrale del complesso promotore dell'anafase/ciclosoma (APC/C), una grande ubiquitina ligasi E3 essenziale per la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18485873 PMID:27120157 PMID:27509861
• L'APC/C media l'ubiquitinazione delle proteine bersaglio, formando principalmente poliuibiquitina catene legate a Lys-11, ma anche catene legate a Lys-48 e Lys-63, oltre a catene ramificate Lys-11/Lys-48, per innescare la degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:18485873 PMID:29033132
• Durante la transizione dalla metafase all'anafase, l'APC/C viene attivato da CDC20, portando alla degradazione della ciclina B e della securina, promuovendo così la segregazione cromosomica e l'uscita dalla mitosi. Riferimenti correlati: PMID:27120157 PMID:27509861
• L'attività dell'APC/C è strettamente regolata dal complesso del checkpoint mitotico (MCC), che inibisce l'APC/C finché tutti i cromosomi non sono correttamente attaccati al fuso mitotico, prevenendo l'inizio prematuro dell'anafase. Riferimenti correlati: PMID:27509861
• CDC27 si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nel fuso mitotico, coerentemente con i suoi ruoli dinamici nei checkpoint del ciclo cellulare e nella dinamica cromosomica.
• La proteina contiene ripetizioni TPR ed è soggetta a fosforilazione, il che sottolinea le sue interazioni regolatorie e il controllo post-traduzionale all'interno dell'oloenzima APC/C.
• L'impianto alternativo genera più isoforme, aumentando la diversità funzionale di CDC27 in diversi contesti cellulari.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 702–824 di CDC27 umano, una regione probabilmente esposta sulla proteina nativa; questo progetto favorisce la rilevazione sia delle forme endogene che ricombinanti in WB.
• In WB è prevista una banda vicino a 92 kDa; confermare la specificità utilizzando controlli positivi (ad esempio, lisato di cellule HeLa) e negativi appropriati, e considerare l'utilizzo di un controllo di caricamento.
• Per le applicazioni ELISA, convalidare il legame contro la regione epitopo specifica o CDC27 a lunghezza intera per garantire sensibilità e specificità del saggio.
• È indicata la reattività crociata con CDC27 murino; testare su campioni di tessuto o linee cellulari di topo rilevanti se si bersagliano ortologhi murini.

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