Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CDK1 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P06493

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CDK1

• CDK1 (Chinasi dipendente da ciclina 1) è la subunità catalitica del fattore promotore della fase M (MPF), essenziale per la transizione G2-M e l'inizio mitotico. Fosforila numerosi substrati per guidare la separazione dei centrosomi, la dinamica del Golgi, la disgregazione dell'involucro nucleare e la condensazione cromosomica. Riferimenti correlati: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720 PMID:18480403 PMID:20360007
• La sua attività è strettamente regolata dal legame con le cicline e dalla fosforilazione reversibile. Durante la fase G2, le fosfatasi CDC25 rimuovono le fosforilazioni inibitorie per attivare CDK1, mentre le chinasi WEE1/PKMYT1 la inibiscono. Una volta che i cromosomi si allineano in metafase, l'inattivazione di CDK1 da parte di WEE1/PKMYT1 consente l'uscita dalla mitosi e la citochinesi. Riferimenti correlati: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• CDK1 si localizza in molteplici compartimenti subcellulari, inclusi nucleo, citoplasma, mitocondri e strutture mitotiche come centrosomi e fuso, riflettendo i suoi ruoli diversificati nella divisione cellulare.
• Fosforila le lamine (LMNA, LMNB1, LMNB2) all'ingresso mitotico, innescando lo smantellamento della lamina nucleare e la disgregazione dell'involucro nucleare. Riferimenti correlati: PMID:2188730 PMID:2344612 PMID:37788673
• Oltre alla mitosi, CDK1 regola l'apoptosi, i ritmi circadiani e il silenziamento genico attraverso la fosforilazione di bersagli come FOXO1, NR1D1 ed EZH2. Funge anche da recettore per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV) negli epatociti.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che ne modulano l'attività e la stabilità. CDK1 è anche un attore chiave nei checkpoint del danno al DNA, dove la fosforilazione mediata da PKR/EIF2AK2 e WEE1 arresta il ciclo cellulare per consentire la riparazione.
• L'espressione tissutale è diffusa, con livelli elevati nelle cellule proliferanti e una notevole associazione con i tessuti del carcinoma mammario.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 198-297 di CDK1 umano, una regione contenente siti chiave di fosforilazione regolatoria. Assicurarsi che l'epitopo non sia mascherato da modifiche post-traduzionali nel campione.
• Per il Western blot, attendersi una banda intorno a 34 kDa. Poiché CDK1 è regolato dal ciclo cellulare, considerare la sincronizzazione delle cellule o l'arricchimento di popolazioni mitotiche per migliorare il segnale.
• Quando si utilizza per l'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo. Si raccomanda l'inclusione di controlli positivi e negativi appropriati (ad es., campioni non trattati vs. campioni arrestati nel ciclo cellulare).
• Convalidare la reattività incrociata nei vostri specifici tessuti/ceppi di topo o ratto, poiché l'omologia di sequenza può influenzare il rilevamento.
• Questo anticorpo è stato testato in WB, IHC-P, IF/ICC, IP ed ELISA; considerare di eseguire esperimenti pilota per confermare l'idoneità per il vostro specifico saggio e specie bersaglio.

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