Anticorpo policlonale di coniglio anti-CDK11B per IF/ICC, ELISA - P21127

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDK11B

• CDK11B, noto anche come serina/treonina-protein chinasi PITSLRE CDC2L1 o p58 CLK-1, è una chinasi ciclina-dipendente codificata dal gene CDK11B. Esiste sotto forma di molteplici isoforme dovute a inizio e splicing alternativi; alcune isoforme vengono espresse in modo indipendente dal ciclo cellulare, mentre altre specificamente durante le fasi G2-M. Riferimenti correlati: PMID:12082095, PMID:2217177
• CDK11B agisce come regolatore chiave dello splicing del pre-mRNA mediando la fosforilazione di SF3B1, che facilita l'associazione di SF3B1 con gli snRNA U5 e U6 nello spliceosoma attivato, favorendo così l'assemblaggio dello spliceosoma. Riferimenti correlati: PMID:36104565, PMID:38059508
• La chinasi svolge inoltre la funzione di regolatore della trascrizione fosforilando la serina-2 del dominio C-terminale (CTD) della subunità maggiore POLR2A della RNA polimerasi II, un evento critico per l'allungamento e la maturazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:32367068, PMID:40858114
• CDK11B è coinvolto nella trascrizione dei geni degli istoni dipendente dalla replicazione. Si lega ai geni degli istoni e fosforila POLR2A sulla serina-2 del CTD, controllando specificamente l'allungamento trascrizionale degli istoni e il reclutamento dei fattori di processamento dell'estremità 3'. Riferimenti correlati: PMID:32367068
• Come parte di un checkpoint trascrizionale a monte di CDK9, CDK11B regola la pausa prossimale al promotore della RNA polimerasi II, una pausa che si verifica dopo l'inizio ma prima dell'allungamento, probabilmente attraverso la fosforilazione del CTD. Riferimenti correlati: PMID:40858114
• Durante la mitosi, CDK11B promuove la trascrizione centromerica per mantenere la coesione centromerica; la sua attività chinasica è essenziale per la corretta coesione dei cromatidi fratelli e la segregazione cromosomica. Riferimenti correlati: PMID:24436071, PMID:38019613
• La localizzazione subcellulare comprende il nucleo, i cromosomi (inclusi i centromeri) e il citoplasma, coerentemente con i suoi ruoli nella trascrizione, nello splicing e nella mitosi. La proteina è espressa ubiquitariamente, con alcune evidenze di una distribuzione tissutale specifica per isoforma.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (viene attivata dal complesso chinasi attivante CDK, costituito da CDK7, ciclina H e MAT1) e l'ubiquitinazione (legame isopeptidico e coniugazione Ubl), come annotato nell'elenco delle parole chiave di UniProt. Riferimenti correlati: PMID:41100585

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato come proteina di fusione ricombinante comprendente gli amminoacidi 1-130 di CDK11B umano (NP_277021.2), con targeting della regione N-terminale. Per IF/ICC, si consiglia di testare diversi metodi di fissazione e permeabilizzazione, poiché CDK11B si localizza nel nucleo, nei cromosomi e nel citoplasma.
• Nell'ELISA, validare la reattività dell'anticorpo con l'immunogeno o con lisati cellulari/tissutali pertinenti in condizioni standard di analisi. Poiché l'anticorpo è policlonale di coniglio, possono verificarsi variazioni da un lotto all'altro; si consiglia di titolare la diluizione ottimale per la propria configurazione sperimentale.
• È prevista la reattività crociata con proteine umane, murine e di ratto, ma i livelli di espressione della proteina endogena devono essere confermati nel sistema del campione target.

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