Anti-CDK12 pAb di coniglio per WB, IHC-P, ELISA - Q9NYV4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDK12

• CDK12 è una chinasi ciclina-dipendente che agisce come regolatore chiave dell'allungamento della trascrizione mediante fosforilazione del dominio C-terminale (CTD) della subunità maggiore della RNA polimerasi II (POLR2A).
• Fosforila preferenzialmente la serina-5 delle ripetizioni del CTD già fosforilate sulla serina-7, e può anche fosforilare la serina-2, modulando la processività della RNA polimerasi II.
• CDK12 è necessario per l'espressione dei geni coinvolti nella riparazione del DNA, svolgendo quindi un ruolo fondamentale nel mantenimento della stabilità genomica.
• La chinasi partecipa anche allo splicing dell'RNA, probabilmente attraverso la fosforilazione del fattore di splicing SRSF1/SF2, collegando l'allungamento della trascrizione allo splicing co-trascrizionale.
• CDK12 è coinvolto nella regolazione della segnalazione delle chinasi MAP, che può influenzare la risposta cellulare agli inibitori estrogenici.
• Subcellularmente, CDK12 si localizza prevalentemente nel nucleo, in particolare alle macchie nucleari, che sono siti di trascrizione e splicing attivi.
• La proteina è ampiamente espressa in diversi tessuti, riflettendo il suo ruolo generale nella regolazione trascrizionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-300), che può permettere la rilevazione di più isoforme di CDK12 se l'estremità N-terminale è conservata; verificare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 164 kDa; utilizzare una percentuale di gel adatta (es. 6-8%) e tempi di trasferimento prolungati per proteine ad alto peso molecolare.
• Essendo un anticorpo policlonale, offre una rilevazione del segnale robusta ma può presentare variabilità tra lotti; includere controlli positivi e negativi appropriati (es. lisati di knockdown o knockout di CDK12).
• Per l'immunohistochimica (IHC-P), aspettarsi una colorazione nucleare; ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6,0) e la diluizione dell'anticorpo per i tuoi campioni di tessuto.
• La reattività crociata è riportata per uomo, topo e ratto; convalidare le prestazioni se si utilizzano altre specie.
• L'anticorpo è adatto per ELISA; considerare l'utilizzo della proteina CDK12 ricombinante come standard per determinare il titolo e la specificità dell'anticorpo.

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