Anticorpo Policlonale Anti-CDK4 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P11802

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CDK4

• CDK4 (Chinasi 4 dipendente dalle cicline), nota anche come Proteina chinasi 4 della divisione cellulare o PSK-J3, è una serina/treonina-proteina chinasi codificata dal gene CDK4. È un componente chiave dei complessi ciclina D-CDK4 che regolano la progressione del ciclo cellulare.
• Come parte del complesso ciclina D-CDK4, CDK4 fosforila e inibisce i membri della famiglia delle proteine del retinoblastoma (RB), incluso RB1, durante la transizione G1/S. Questa fosforilazione porta alla dissociazione del fattore di trascrizione E2F dai complessi RB/E2F, consentendo la trascrizione dei geni target di E2F necessari per la progressione attraverso la fase G1.
• CDK4 ipofosforila RB1 nella prima fase G1 e funge da principale integratore di vari segnali mitogenici e antimitogenici attraverso la sua attività nel complesso ciclina D-CDK4.
• CDK4 fosforila anche SMAD3 in modo dipendente dal ciclo cellulare, reprimendone l'attività trascrizionale, evidenziando il suo ruolo oltre la regolazione di RB.
• CDK4 forma un complesso ternario con ciclina D e CDKN1B (p27), necessario per la traslocazione nucleare e l'attività del complesso ciclina D-CDK4.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo e la membrana nucleare, riflettendo il suo ruolo dinamico nella regolazione del ciclo cellulare.
• Le parole chiave di UniProt indicano il coinvolgimento in acetilazione, splicing alternativo, legame ATP, ciclo cellulare, divisione cellulare e varianti di malattia; è una fosfoproteina legata a vie correlate al cancro.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 200-303 di CDK4 umano, una regione prossimale al C-terminale. Questo epitopo potrebbe influenzare il riconoscimento in alcune applicazioni; si consiglia di validare nel contesto sperimentale specifico.
• Per il Western blot (WB), ci si aspetta una banda intorno a 34 kDa. Validare in lisati cellulari umani e murini che esprimono CDK4, poiché è riportata reattività crociata per entrambe le specie.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), esplorare sia i modelli di colorazione citoplasmatica che nucleare, coerenti con la localizzazione subcellulare di CDK4. Includere appropriati passaggi di fissazione e permeabilizzazione.
• L'immunoprecipitazione (IP) con questo anticorpo policlonale può arricchire i complessi CDK4; considerare di verificare la co-precipitazione di ciclina D o CDKN1B se si studia il complesso ternario.
• Essendo un anticorpo policlonale, la consistenza da lotto a lotto dovrebbe essere verificata per saggi quantitativi come l'ELISA. Eseguire esperimenti di titolazione per determinare le diluizioni di lavoro ottimali.

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