Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CDK8 per WB e ELISA - P49336

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CDK8

• La CDK8 è la subunità catalitica del complesso Mediatore, un grande coattivatore necessario per la trascrizione di quasi tutti i geni dipendenti dalla RNA polimerasi II. Il Mediatore collega le proteine regolatorie gene-specifiche e il macchinario di trascrizione basale.
• Agisce come serina/treonina-protein chinasi che fosforila il dominio C-terminale (CTD) della RNA polimerasi II, inibendo la formazione del complesso di inizio della trascrizione. Fosforila inoltre la CCNH, portando alla down-regolazione del TFIIH e alla repressione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:10993082
• Interagisce con MAML1 per iperfosforilare il dominio intracellulare di NOTCH, promuovendone la degradazione e modulando la segnalazione NOTCH. Riferimenti correlati: PMID:15546612
• Viene reclutato per regolare selettivamente la risposta all'interferone tramite fosforilazione del dominio di transattivazione del fattore di trascrizione STAT1 (per similarità).
• Si localizza prevalentemente nel nucleo, coerente con il suo ruolo nella regolazione trascrizionale.
• Subisce modifiche post-traduzionali; lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.
• Le varianti genetiche della CDK8 sono legate a disturbi del neurosviluppo, tra cui il disturbo dello spettro autistico e la disabilità intellettiva.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) della CDK8 umana, che è altamente conservata tra i mammiferi, e questo supporta la reattività crociata osservata con topo e ratto.
• Per Western blot è attesa una banda a circa 53 kDa. Ottimizzare il buffer di lisi e la preparazione del campione per tenere conto dell'incorporazione della CDK8 nel grande complesso Mediatore.
• Quando si utilizza l'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento che riconosca un epitopo distinto o una modifica post-traduzionale per aumentare la specificità per la chinasi attivata.
• Validare l'anticorpo nel vostro sistema di campioni specifico, poiché i livelli di espressione della CDK8 possono variare tra i tipi cellulari e le condizioni fisiologiche.

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