Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-CDK9 (Validato KO) per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P50750

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CDK9

• Il CDK9 è una chinasi proteica serina/treonina che funge da subunità catalitica del complesso del fattore b di allungamento della trascrizione positivo (P-TEFb), il quale fosforila il dominio C-terminale (CTD) della RNA polimerasi II per promuovere l'allungamento della trascrizione.
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• Il CDK9 forma inoltre un complesso con la ciclina-K che mostra attività chinasica verso il CTD della RNAP II ed è essenziale per il mantenimento dell'integrità del genoma facilitando il ripristino dall'arresto della replicazione e limitando i danni al DNA.
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• Fosforila un'ampia gamma di substrati, inclusi EP300, MYOD1, AR, i fattori di allungamento negativi DSIF e NELF, e l'istone H1.4, regolando così processi diversi come la differenziazione muscolare, la segnalazione del recettore degli androgeni e la struttura della cromatina.
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• Il P-TEFb partecipa anche alle modificazioni istoniche cotrascrizionali, alla elaborazione dell'mRNA e all'esportazione dell'mRNA, collegando l'allungamento della trascrizione con il rimodellamento della cromatina.
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• Il CDK9 è coinvolto nelle reti trascrizionali inducibili dalle citochine, come l'attivazione di RELA/p65 indotta da TNF e la segnalazione STAT3 indotta da IL-6, ed è implicato nella patogenesi virale e nell'ingrandimento dei miociti cardiaci.
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• La proteina si localizza nel nucleo e nel citoplasma, ed è trovata anche nei corpi PML, coerente con i suoi ruoli nella regolazione della trascrizione e nella riparazione del DNA.
• Il CDK9 è espresso ubiquitariamente nei tessuti, riflettendo il suo ruolo fondamentale nella trascrizione.
• Funzioni aggiuntive includono la fosforilazione di KAT5 per promuovere l'attività istone acetiltransferasi e la modulazione delle modificazioni istoniche come la monoubiquitinazione H2B, la trimetilazione H3K4 e H3K36me3.
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Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo monoclonale è stato generato contro un peptide sintetico corrispondente agli aminoacidi 273-372 del CDK9 umano, una regione probabilmente conservata tra umano, mouse e ratto, coerente con l'ampia reattività crociata tra specie.
• Per il Western blot, è prevista una banda SDS-PAGE intorno a 43 kDa per il CDK9; tuttavia, le modificazioni post-traduzionali o le varianti di splicing possono produrre bande aggiuntive. Verificare utilizzando appropriati controlli negativi.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), si raccomanda la titolazione dell'anticorpo primario e l'ottimizzazione delle condizioni di recupero dell'antigene per ottenere rapporti segnale-rumore ottimali.
• La validazione knock-out indica che questo anticorpo riconosce il suo bersaglio specificamente; ciononostante, ogni laboratorio dovrebbe validare l'anticorpo nei propri contesti di campione e saggio, idealmente utilizzando controlli knockout o knockdown.
• Questo anticorpo può essere utilizzato nell'immunoprecipitazione (IP) per arricchire il CDK9 e i complessi associati; per l'analisi successiva, considerare l'utilizzo di anticorpi mirati a diversi epitopi per minimizzare le interferenze.

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