Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CDKN1A per WB, ELISA - P39689

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CDKN1A

• CDKN1A (p21) è un inibitore delle chinasi ciclina-dipendenti della famiglia Cip/Kip, originariamente identificato come proteina interagente con CDK, proteina associata alla differenziazione del melanoma e fattore indotto da p53.
• Media l'arresto del ciclo cellulare in G1/S e G2 legandosi e inibendo le chinasi ciclina-dipendenti (CDK2, CDK4/6), bloccando così la fosforilazione di RB1 e la trascrizione genica dipendente da E2F1 (PubMed:36689330). A livelli stechiometrici, p21 facilita l'assemblaggio e l'importazione nucleare del complesso ciclina D-CDK4, mentre a concentrazioni più elevate ne inibisce l'attività chinasica (PubMed:25329316). Riferimenti correlati: PMID:36689330 PMID:25329316
• Svolge un ruolo centrale nell'arresto in G2 indotto da danno al DNA attraverso meccanismi sia dipendenti da p53/TP53 che indipendenti da p53, incluso l'arresto mediato da CREB3L1 in astrociti e osteoblasti (PubMed:37178686). Riferimenti correlati: PMID:37178686
• CDKN1A si lega competitivamente a PCNA, spostando POLD3 e inibendo così la sintesi del DNA da parte della DNA polimerasi delta.
• Si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, coerente con i suoi ruoli nella regolazione del ciclo cellulare e nella segnalazione citoplasmatica.
• L'espressione è stata confermata a livello proteico nei cheratinociti.
• Le parole chiave associate a questa proteina includono acetilazione, fosforilazione, coniugazione dell'ubiquitina, domini zinc-finger e legame ai metalli, riflettendo una complessa regolazione post-traduzionale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo policlonale di coniglio è CDKN1A di topo ricombinante a lunghezza intera (aa 1-159), che dovrebbe riconoscere epitopi multipli e sia le forme non modificate che quelle modificate post-traduzionalmente della p21 endogena in campioni di topo e ratto.
• Per l'analisi Western blot, è prevista una banda a 18 kDa; tuttavia, a causa di modifiche post-traduzionali (es. fosforilazione, ubiquitinazione), potrebbero essere osservate specie a peso molecolare più alto o variazioni di mobilità.
• L'anticorpo è fornito per applicazioni WB ed ELISA. In ELISA sandwich, considerare di accoppiare questo policlonale come anticorpo di rilevamento con un anticorpo di cattura validato.
• L'espressione di p21 è tipicamente bassa nelle cellule in ciclo, ma fortemente aumentata in seguito a danno al DNA. Considerare di trattare i campioni con agenti dannosi per il DNA (es. etoposide, doxorubicina) o di sottoporli a privazione sierica per indurre p21 prima del test.

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