Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-CDKN1A/p21CIP1 per WB, IHC-P, ELISA - P38936

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CDKN1A/p21CIP1

• L'inibitore 1 delle chinasi ciclina-dipendenti, designato CDKN1A, è anche noto come p21, CIP1, WAF1, SDI1, CAP20, CDKN1 e MDA-6. Funziona come un potente regolatore del ciclo cellulare.
• CDKN1A svolge un ruolo critico nell'arresto del ciclo cellulare mediato da p53/TP53 in risposta al danno al DNA, bloccando la progressione G1/S e consentendo la riparazione del DNA (PubMed:9106657). Riferimenti correlati: PMID:9106657
• La proteina si lega e inibisce i complessi delle chinasi ciclina-dipendenti (CDK), impedendo la fosforilazione di substrati chiave come RB1, arrestando così la progressione del ciclo cellulare.
• A rapporti stechiometrici bassi, CDKN1A promuove la localizzazione nucleare e l'assemblaggio del complesso ciclina D-CDK4, aumentandone l'attività chinasica verso RB1, mentre a rapporti più alti inibisce il complesso.
• CDKN1A compete con POLD3 per il legame all'antigene nucleare delle cellule proliferanti (PCNA), risultando nell'inibizione della sintesi del DNA da parte della DNA polimerasi delta (PubMed:11595739). Riferimenti correlati: PMID:11595739
• La proteina si localizza principalmente nel nucleo ma si trova anche nel citoplasma. La sua localizzazione nucleare è essenziale per l'inibizione delle CDK, e la sua attività è modulata da modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione.
• CDKN1A è espressa in modo ubiquitario nei tessuti adulti, con livelli circa cinque volte inferiori nel cervello rispetto ad altri tessuti.
• Oltre al suo ruolo canonico, CDKN1A partecipa all'arresto G2 indotto da danno al DNA indipendente da p53 tramite il pathway CREB3L1 in astrociti e osteoblasti (Per somiglianza).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende i 164 amminoacidi N-terminali di CDKN1A/p21CIP1 umano, coprendo la proteina a lunghezza intera; confermare che l'anticorpo rilevi la p21 endogena a circa 18 kDa mediante Western blot.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si può osservare colorazione sia nucleare che citoplasmatica. Ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo utilizzando tessuti di controllo positivo noti come carcinoma del colon o cellule proliferanti.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare proteina p21 ricombinante o lisati cellulari da campioni con p53 attivato per stabilire curve standard e validare la specificità.
• Poiché l'espressione di p21 è strettamente regolata da p53 e dallo stress cellulare, considerare di trattare le cellule con agenti dannosi per il DNA (es. doxorubicina) per indurre p21 prima del rilevamento.

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