Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-CDKN1A/p21CIP1 per WB, IP, IF/ICC, ELISA - P38936

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDKN1A/p21CIP1

• L'inibitore 1 della chinasi dipendente da ciclina (p21) è un potente inibitore delle chinasi dipendenti da ciclina, fondamentale per il controllo della progressione del ciclo cellulare ai checkpoint G1/S e G2/M. Riferimenti correlati: PMID:9106657
• Media l'inibizione della proliferazione cellulare dipendente da p53/TP53 in risposta al danno del DNA e partecipa anche all'arresto G2 indipendente da p53 tramite CREB3L1 in specifici tipi cellulari come gli astrociti e gli osteoblasti.
• p21 si lega e inibisce i complessi ciclina D-CDK4, ciclina E-CDK2 e ciclina A-CDK2, ma a bassa stechiometria può anche facilitare l'assemblaggio e l'importazione nucleare dei complessi ciclina D-CDK4, promuovendo quindi la fosforilazione di RB1.
• Inibisce direttamente la sintesi del DNA competendo con POLD3 per il legame con l'antigene nucleare delle cellule in proliferazione (PCNA), bloccando così l'attività della DNA polimerasi delta. Riferimenti correlati: PMID:11595739
• La localizzazione subcellulare comprende sia il nucleo che il citoplasma, riflettendo i suoi ruoli nella regolazione nucleare del ciclo cellulare e le sue funzioni citoplasmatiche.
• p21 è ampiamente espresso in tutti i tessuti adulti, con livelli circa cinque volte inferiori nel cervello.
• La proteina è soggetta a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua stabilità, localizzazione e funzione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per l'analisi Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 18 kDa; si consiglia di utilizzare un marcatore a basso peso molecolare e ottimizzare le condizioni di trasferimento.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), validare l'efficienza dell'anticorpo con lisati di controllo positivo appropriati, come cellule trattate per danno del DNA che esprimono p21.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), p21 mostra localizzazione sia nucleare che citoplasmatica; assicurarsi che le condizioni di permeabilizzazione e fissazione siano adatte a entrambi i compartimenti.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come agente di cattura o di rivelazione; validare linearità e specificità utilizzando proteina p21 ricombinante o lisati cellulari.
• Data la reattività crociata con il topo, l'anticorpo è adatto per studi su tessuti murini; tuttavia, verificare le prestazioni nei vostri saggi specifici.

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