Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CDKN1A/p21CIP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38936

Specifiche e Parametri Nucleo del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CDKN1A/p21CIP1

• CDKN1A/p21CIP1 è un inibitore delle chinasi ciclina-dipendenti che svolge un ruolo critico nel controllo della progressione del ciclo cellulare e nell'arresto in G2 indotto da danno al DNA (PubMed:9106657). Riferimenti correlati: PMID:9106657
• La proteina agisce come un mediatore chiave dell'inibizione della proliferazione cellulare dipendente da p53/TP53 in risposta al danno al DNA, e partecipa anche a vie di arresto in G2 indipendenti da p53 in alcuni tipi cellulari.
• p21 si lega e inibisce l'attività delle chinasi ciclina-dipendenti, prevenendo la fosforilazione di substrati critici come RB1 per bloccare la progressione del ciclo cellulare; facilita inoltre la localizzazione nucleare e l'assemblaggio del complesso ciclina D-CDK4, con il suo effetto sull'attività chinasi dipendente dalla stechiometria.
• Inibisce la sintesi del DNA legandosi a PCNA (antigene nucleare delle cellule in proliferazione) e competendo con POLD3 per il legame con PCNA, bloccando così la processività della DNA polimerasi delta (PubMed:11595739). Riferimenti correlati: PMID:11595739
• CDKN1A si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, permettendole di regolare i meccanismi del ciclo cellulare e altri processi in molteplici compartimenti subcellulari.
• Esprime in modo ubiquitario nei tessuti adulti, con livelli notevolmente più bassi nel cervello.
• La proteina presenta un dominio zinc-finger ed è soggetta a modificazioni post-traduzionali come fosforilazione e acetilazione, che ne modulano la stabilità e le interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1-164 di p21 umano; questa regione include il dominio N-terminale coinvolto nel legame con CDK e cicline, potenzialmente producendo anticorpi che riconoscono la proteina nativa e denaturata.
• Per l'analisi Western blot (WB), è attesa una banda a circa 18 kDa corrispondente a p21; tuttavia, a causa di modificazioni post-traduzionali, si possono osservare lievi spostamenti.
• Quando si esegue l'immunoistochimica (IHC-P) o l'immunofluorescenza (IF/ICC), può essere necessaria l'ottimizzazione della preparazione del campione e del recupero dell'antigene per ottenere una colorazione robusta.
• È stata notata la reattività incrociata dell'anticorpo con p21 di topo e ratto, ma è consigliabile verificarne la specificità nel tessuto o nella linea cellulare di interesse.
• Per le applicazioni ELISA, sono raccomandate titolazioni preliminari a scacchiera per determinare la concentrazione ottimale dell'anticorpo di rivestimento e di rilevamento.

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