Anticorpo policlonale anti-CDKN1B/p27KIP1 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P46527

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDKN1B/p27KIP1

• CDKN1B codifica l'inibitore 1B delle chinasi ciclina-dipendenti, noto anche come p27Kip1, un regolatore chiave della progressione del ciclo cellulare, che media principalmente l'arresto in G1.
• Inibisce i complessi ciclina E-CDK2 e ciclina A-CDK2, bloccando così la progressione del ciclo cellulare, ma ha scarso effetto inibitorio su CDK2 legata a SPDYA. Riferimenti correlati: PMID:28666995
• p27Kip1 interagisce anche con i complessi ciclina D-CDK4, modulandone l'assemblaggio, la stabilità e l'attivazione; il suo effetto può essere inibitorio o attivante a seconda dello stato di fosforilazione e della stechiometria.
• La localizzazione subcellulare comprende nucleo, citoplasma ed endosomi, riflettendo la regolazione dinamica durante il ciclo cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali, in particolare la fosforilazione, controllano l'attività e la distribuzione subcellulare di p27Kip1 (Parole chiave: Fosfoproteina).
• È espressa in tutti i tessuti analizzati, con i livelli più elevati nel muscolo scheletrico e quelli più bassi nel fegato e nei reni; l'espressione della proteina è stata confermata nel rene. Riferimenti correlati: PMID:15509543 PMID:8033212
• CDKN1B agisce funzionalmente come soppressore tumorale e la sua disregolazione è implicata in diversi tumori (Parole chiave: Soppressore tumorale).
• La proteina è sottoposta a coniugazione ubiquitina-simile (Ubl) ed è stata identificata mediante proteomica, indicando meccanismi di controllo post-traduzionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende la p27Kip1 umana a lunghezza intera (amminoacidi 1-198), includendo domini funzionali noti; l'anticorpo può rilevare sia le forme fosforilate sia quelle non fosforilate. Considerare il trattamento con fosfatasi nei test pertinenti.
• Per il Western blotting, è prevista una banda a circa 22 kDa; ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni di blocco per il campione specifico.
• Nell'immunocolorazione (IF/ICC, IHC-P), tenere presente che p27Kip1 può localizzarsi nel nucleo, nel citoplasma o negli endosomi a seconda della fase del ciclo cellulare e delle modifiche; validare la distribuzione subcellulare nel proprio sistema modello.
• Poiché l'anticorpo presenta reattività crociata con topo e ratto, è adatto per studi sui roditori; tuttavia, verificare la reattività specifica per specie e il background nel proprio assetto sperimentale.
• Per l'ELISA, assicurarsi di utilizzare condizioni appropriate di rivestimento e rilevazione; questo anticorpo può essere utilizzato per applicazioni di rilevazione diretta o indiretta.

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