Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CDKN2A/p19ARF per WB, ELISA - Q64364

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CDKN2A/p19ARF (soppressore tumorale ARF)

• CDKN2A codifica per due proteine distinte tramite splicing alternativo: p16INK4a e p19ARF (il soppressore tumorale ARF). La proteina p19ARF non è correlata a p16INK4a nella sequenza amminoacidica.
• p19ARF agisce come un potente soppressore tumorale inducendo l'arresto del ciclo cellulare nelle fasi G1 e G2. Riferimenti correlati: PMID:8521522 PMID:9393858 PMID:15601844 PMID:17936562
• Si lega a MDM2 e lo sequestra nel nucleolo, bloccando la degradazione di p53 e migliorando la transattivazione e l'apoptosi dipendenti da p53. Riferimenti correlati: PMID:10359817 PMID:9529248
• p19ARF induce anche l'arresto in G2 e l'apoptosi in modo indipendente da p53, impedendo l'attivazione dei complessi ciclina B1/CDC2. Riferimenti correlati: PMID:15361884
• Regola negativamente la repressione trascrizionale indotta da BCL6 legandosi a BCL6. Riferimenti correlati: PMID:15567177
• Localizzazione subcellulare: si trova principalmente nel nucleolo e nel nucleoplasma; esiste un'isoforma mitocondriale a vita breve.
• p19ARF è coinvolto nelle funzioni nucleolari, come l'inibizione della biogenesi dei ribosomi interagendo con TTF1 e promuovendo la degradazione di NPM1. Riferimenti correlati: PMID:20513429
• Funzioni aggiuntive includono la regolazione della sumoilazione, l'interazione con E2F1 e MYC, e un ruolo nell'autofagia e nella morte cellulare indipendente dalle caspasi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dagli amminoacidi 1-100 di p19ARF di topo. L'anticorpo riconosce probabilmente la regione N-terminale della proteina.
• Per il Western blot (WB), testare l'anticorpo su linee cellulari di topo note per esprimere p19ARF. Il peso molecolare previsto è di circa 19 kDa, ma potrebbero apparire bande aggiuntive a causa di modifiche post-traduzionali o isoforme alternative. Si raccomanda un campione di controllo positivo che esprima p19ARF.
• Per l'ELISA, il peptide immunizzante può fungere da controllo positivo. Validare il saggio con concentrazioni note del peptide per stabilire curve standard.
• La reattività crociata dell'anticorpo è riportata per il topo. Se si lavora con altre specie, verificare la reattività sperimentalmente.
• È richiesta la spedizione con borsa del ghiaccio; conservare l'anticorpo a -20°C o come raccomandato al momento della ricezione.

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