Anticorpo monoclonale Anti-CELF1 per WB, IP, ELISA - Q92879

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CELF1

• CELF1 (CUGBP Elav-like family member 1) è una proteina legante l'RNA di 52 kDa che regola eventi post-trascrizionali inclusi lo splicing alternativo del pre-mRNA, la traduzione dell'mRNA e la stabilità dell'mRNA.
• Media l'inclusione e/o l'esclusione degli esoni in modo tessuto-specifico e regolato dallo sviluppo. Ad esempio, attiva l'inclusione dell'esone 5 del TNNT2 cardiaco durante il rimodellamento cardiaco e controlla lo splicing alternativo dei pre-mRNA dell'actnina e di INSR.
• CELF1 aumenta la traduzione e influenza la scelta del codone di inizio traduzione dell'mRNA CEBPB, potenzia la traduzione di CDKN1A antagonizzando CALR3, e media la rapida deadenilazione citoplasmatica dell'mRNA reclutando PARN alle code poli(A).
• La proteina si lega alle ripetizioni triplette (CUG)n, agli elementi di risposta Bruno (BRE), agli elementi ricchi di AU (ARE) e alle sequenze enhancer dello splicing specifiche del muscolo (MSE) negli mRNA bersaglio.
• CELF1 è coinvolto nella biogenesi dei miRNA: si lega al microRNA primario pri-MIR140 e, insieme a CELF2, regola negativamente la processazione in miRNA maturo. Riferimenti correlati: PMID:28431233
• Localizzazione subcellulare: CELF1 si trova sia nel nucleo che nel citoplasma, in linea con i suoi ruoli nello splicing nucleare e nella regolazione citoplasmatica dell'mRNA.
• Specificità tissutale: Espressa ubiquitariamente.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e formazione di legami isopeptidici, che possono modulare la sua attività e le interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (aa 1-100); considerare l'uso di questa informazione per esperimenti di mappatura dell'epitopo o di blocco.
• Per il WB, aspettarsi una banda a ~52 kDa. Ottimizzare la percentuale di gel (es. SDS-PAGE al 10%) e le condizioni di trasferimento per proteine di peso molecolare medio.
• Data la reattività incrociata con umano, topo e ratto, validare l'anticorpo in lisati di queste specie. Includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l'IP, utilizzare perle protein A/G data l'origine IgG di coniglio. Confermare l'arricchimento mediante western blot.
• CELF1 subisce multiple PTM che possono causare spostamenti di banda; includere inibitori della fosfatasi nel tampone di lisi se le isoforme fosforilate sono di interesse.
• L'anticorpo è adatto per ELISA; considerare di rivestire direttamente l'antigene o utilizzare una coppia cattura-rivelazione per ELISA sandwich.

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