Anticorpo policlonale coniglio anti-CFTR per WB, IF/ICC, ELISA - P13569

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CFTR

• Il CFTR (Regolatore della conduttanza transmembrana nella fibrosi cistica), anche designato come membro 7 della sottofamiglia C delle cassette di legame all'ATP (ABCC7), è una glicoproteina transmembrana di grandi dimensioni appartenente alla famiglia dei trasportatori ABC.
• Funziona principalmente come canale del cloruro regolato dall'cAMP che media il trasporto di ioni cloruro attraverso le membrane delle cellule epiteliali, un processo controllato da cicli di legame e idrolisi dell'ATP nei suoi domini di legame dei nucleotidi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:10792060 PMID:11524016 PMID:11707463
• Il CFTR è anche permeabile agli ioni bicarbonato (HCO3-) e media il flusso dipendente da ATP del glutatione, contribuendo all'omeostasi del pH e redox nei tessuti epiteliali.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15010471 PMID:19019741 PMID:12727866
• Il canale svolge un ruolo fondamentale nell'omeostasi del liquido superficiale delle vie aeree e nella difesa innata contro i patogeni regolando il trasporto di ioni e acqua, influenzando l'idratazione e la clearance del muco.
  Riferimenti correlati:
  PMID:16645176 PMID:19621064 PMID:26823428 PMID:14668433
• Il CFTR modula l'attività di altri canali ionici e trasportatori, inclusa l'inibizione del canale del sodio epiteliale ENaC e la regolazione del canale del cloruro ANO1, influenzando il trasporto ionico netto.
  Riferimenti correlati:
  PMID:12403779 PMID:22121115 PMID:22178883
• A livello subcellulare, il CFTR attraversa la via secretoria e si localizza principalmente alla membrana cellulare apicale, agli endosomi precoci, agli endosomi di riciclo e al reticolo endoplasmatico, con alcune segnalazioni di localizzazione nucleare.
• Il CFTR è espresso in più tessuti epiteliali inclusi le vie aeree respiratorie (epitelio bronchiale), i dotti pancreatici, le cripte intestinali, le ghiandole sudoripare e il tratto riproduttivo (ovidutto, segmente equatoriale dello spermatozoo).
  Riferimenti correlati:
  PMID:15716351 PMID:22207244 PMID:1284548 PMID:28130590
• La proteina subisce estese modifiche post-traduzionali, inclusa glicosilazione, fosforilazione, palmitoilazione e ubiquitinazione, che regolano il suo traffico, stabilità e attività del canale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 700–840 all'interno del dominio regolatorio (R) del CFTR; pertanto, l'anticorpo policlonale potrebbe riconoscere epitopi in questa regione. Per il western blotting, prevedere una banda principale che migra vicino a 168 kDa; validare le prestazioni in un sistema di campione pertinente, come lisati di cellule epiteliali bronchiali (es. 16HBE) o tessuto polmonare.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, considerare che il CFTR si localizza principalmente alla membrana cellulare apicale e alle vescicole subapicali. Utilizzare protocolli di fissazione/permeabilizzazione appropriati per preservare la colorazione di membrana. La colorazione simultanea con un marcatore apicale può aiutare a confermare la specificità.
• È prevista reattività crociata con il CFTR di topo e ratto; tuttavia, gli utenti dovrebbero titolare l'anticorpo e includere controlli appropriati per ogni specie e applicazione. Poiché si tratta di un reagente policlonale, può verificarsi variabilità da lotto a lotto; si consiglia di riconvalidare ogni nuovo lotto nel saggio previsto.

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