Anticorpo monoclonale coniglio anti-cGAS per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N884

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del cGAS

• cGAS (sintasi ciclica GMP-AMP), noto anche come MB21D1 o C6orf150, è codificato dal gene CGAS. Lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Funziona come nucleotidiltransferasi che catalizza la sintesi del dinucleotide ciclico 2'3'-cGAMP da ATP e GTP. Riferimenti correlati: PMID:21478870, PMID:23258413, PMID:23707061, PMID:28214358, PMID:28363908
• cGAS è un sensore citosolico di DNA fondamentale che si lega direttamente al DNA a doppio filamento (dsDNA) di lunghezza e curvatura sufficienti, portando alla condensazione di fase liquida e all'attivazione enzimatica. Riferimenti correlati: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794, PMID:30007416
• Dopo l'attivazione, il 2'3'-cGAMP prodotto da cGAS si lega all'adattatore STING1, innescando una cascata di segnalazione che induce interferoni di tipo I e altri mediatori immunitari. Riferimenti correlati: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794
• cGAS rileva il dsDNA da un'ampia gamma di patogeni inclusi virus a DNA, retrovirus (es. HIV-2) e batteri (es. M. tuberculosis), rendendolo un sentinella immunitario innato ampio. Riferimenti correlati: PMID:28363908, PMID:35613581, PMID:23929945, PMID:24269171, PMID:30270045, PMID:26048138
• In condizioni di stress cellulare (danno mitocondriale, senescenza, danno al DNA), il self-DNA fuoriesce nel citoplasma o si accumula come micronuclei, attivando aberrantemente cGAS e guidando l'infiammazione sterile. Riferimenti correlati: PMID:28738408, PMID:28759889, PMID:31299200
• cGAS risiede prevalentemente nel citoplasma ma si trova anche nel nucleo, dove il suo legame ai nucleosomi sulla cromatina inibisce la sua attività per prevenire l'attivazione autoimmune. Riferimenti correlati: PMID:31299200, PMID:32911482, PMID:32912999
• Oltre all'immunità, cGAS modula la riparazione del danno al DNA interagendo con PARP1 per sopprimere la ricombinazione omologa e rileva lo stress di traduzione associandosi a ribosomi in collisione. Riferimenti correlati: PMID:30356214, PMID:31544964, PMID:34111399
• L'espressione tissutale è riportata nella linea cellulare monocitica THP1; le modifiche post-traduzionali (acetilazione, fosforilazione, ubiquitinazione, palmitoilazione) regolano dinamicamente la localizzazione e l'attività del cGAS.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno della regione C-terminale (aa 430–522) del cGAS umano. Considerare la verifica del riconoscimento di tutte le varianti di splicing se sono rilevanti multiple isoforme.
• Per Western blot (WB), è prevista una banda di circa 59 kDa; utilizzare controlli positivi appropriati (es. lisato cellulare THP1). Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando campioni con knockout o knockdown di cGAS.
• Per immunochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), potrebbero essere richieste condizioni ottimizzate di recupero dell'antigene e permeabilizzazione. Includere controlli appropriati per confermare la localizzazione nucleare/citosolica.
• Nelle applicazioni ELISA, assicurarsi che il tampone di rivestimento e le condizioni di rilevamento siano compatibili con il formato monoclonale coniglio.
• La reattività incrociata è stata testata solo contro campioni umani; la reattività con altre specie non è caratterizzata e deve essere determinata sperimentalmente.

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