Anticorpo policlonale di coniglio anti-CHAC1 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9BUX1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CHAC1

• CHAC1 (gamma-glutamilciclotransferasi 1 specifica per il glutatione), noto anche come Botch o proteina 1 simile al regolatore del trasporto dei cationi, è una proteina di 24,4 kDa codificata dal gene CHAC1 (ID del gene: 79094).
• Agisce come gamma-glutamilciclotransferasi specifica per il glutatione, scindendo il glutatione in 5-oxo-L-prolina e Cys-Gly, con una specificità per il glutatione superiore rispetto agli altri peptidi gamma-glutamilici. Riferimenti correlati: PMID:27913623
• CHAC1 promuove l'apoptosi riducendo il glutatione e funge da componente pro-apoptotico della via della risposta alle proteine mal ripiegate (UPR), mediando gli effetti della cascata ATF4-ATF3-DDIT3/CHOP. Riferimenti correlati: PMID:19109178
• Regola negativamente la segnalazione di Notch durante la neurogenesi embrionale inibendo la scissione di Notch da parte della furina, mantenendo Notch in una forma immatura e inattiva e promuovendo così la neurogenesi. Riferimenti correlati: PMID:22445366
• A livello subcellulare, CHAC1 si localizza nel citoplasma, nel citosol e nell'apparato di Golgi, in particolare nella rete trans-Golgi.
• Parole chiave: splicing alternativo, apoptosi, liasi, neurogenesi, via di segnalazione di Notch, risposta alle proteine mal ripiegate.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro una proteina ricombinante che comprende gli amminoacidi 1-222 (CHAC1 a lunghezza intera, NP_077016.3), quindi può riconoscere più epitopi ed è previsto che rilevi CHAC1 endogeno.
• Per il western blotting, si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE denaturante, poiché il peso molecolare previsto di CHAC1 è di circa 24 kDa; verificare la dimensione della banda nel proprio sistema sperimentale.
• Controlli positivi appropriati includono linee cellulari o tessuti noti per esprimere CHAC1 in condizioni di risposta alle proteine mal ripiegate (ad esempio, in seguito all'induzione dello stress del reticolo endoplasmatico); includere un controllo di caricamento.
• Per l'immunofluorescenza e l'immunoistochimica, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione e valutare il recupero antigenico per le sezioni incluse in paraffina.
• È stata segnalata reattività crociata con campioni umani, di topo e di ratto; tuttavia, si raccomanda di eseguire test preliminari nel proprio sistema sperimentale per verificare la reattività e ridurre al minimo il legame aspecifico.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo; a seconda del disegno del test, è possibile valutare un formato ELISA diretto o indiretto.

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