Anticorpo policlonale anti-CHAT per WB, IHC, IF, ELISA - P28329

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della colina O-acetiltransferasi

• La colina O-acetiltransferasi (CHAT, nota anche come CHOACTASE) è l'enzima responsabile della sintesi del neurotrasmettitore acetilcolina a partire da acetil-CoA e colina.
• La CHAT catalizza la reazione reversibile alle sinapsi colinergiche, svolgendo un ruolo critico nella neurotrasmissione sia nel sistema nervoso centrale che periferico.
• Come enzima chiave nella biosintesi dell'acetilcolina, la CHAT è essenziale per la funzione dei neuroni colinergici ed è implicata nella segnalazione neuromuscolare.
• Le mutazioni nel gene CHAT sono associate alla sindrome miastenica congenita (CMS), un gruppo di disturbi neuromuscolari caratterizzati da una trasmissione del segnale difettosa alla giunzione neuromuscolare.
• La CHAT subisce splicing alternativo, generando multiple isoforme che possono mostrare modelli di espressione tessuto-specifici.
• La proteina è soggetta a fosforilazione, indicando potenziali ruoli regolatori nell'attività enzimatica tramite modificazioni post-traduzionali.
• Classificata come aciltransferasi e transferasi, la CHAT appartiene a una famiglia di enzimi che trasferiscono gruppi funzionali ai substrati.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 331-630 di CHAT umano, una regione probabilmente conservata tra umano, mouse e ratto, a supporto delle affermazioni di reattività incrociata.
• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di condizioni denaturanti/riducenti e prevedere una banda predominante vicino a 83 kDa, coerente con la proteina CHAT a lunghezza intera; validare con lisati di controllo positivo da tessuti cerebrali umani, di mouse o di ratto.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza (IF/ICC o IF-P) e immunochimica (IHC-P), testare le prestazioni dell'anticorpo su cellule o sezioni tissutali fissate e permeabilizzate; si raccomanda l'inclusione di controlli negativi (es. campioni CHAT knockout o depleti).
• Quando utilizzato in ELISA, la natura policlonale può fornire un segnale potenziato; tuttavia, la coerenza tra i lotti dovrebbe essere verificata per saggi quantitativi.
• Per massimizzare la specificità, si consiglia ai ricercatori di titolare l'anticorpo per i propri sistemi di saggio specifici e confermare i risultati con reagenti di rilevamento secondari ottimizzati per IgG di coniglio.

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