Anticorpo monoclonale Anti-ChAT di coniglio per WB, ELISA - P28329

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ChAT

• La colina O-acetiltransferasi (ChAT) è anche nota con gli alias CHOACTASE, CMS6, CMS1A e CMS1A2.
• Catalizza la sintesi reversibile di acetilcolina (ACh) da acetil CoA e colina nelle sinapsi colinergiche, un passaggio chiave nella neurotrasmissione colinergica.
• ChAT è altamente espressa nei neuroni colinergici del sistema nervoso centrale e periferico ed è localizzata nei terminali presinaptici.
• Lo splicing alternativo del gene CHAT genera varianti di trascritto multiple, potenzialmente influenzando l'attività o la regolazione dell'enzima.
• Sono state identificate modificazioni post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, anche se il loro impatto funzionale è ancora sotto indagine.
• Le mutazioni in CHAT sono collegate alla sindrome miastenica congenita (CMS), un gruppo di disturbi caratterizzati da un'alterata trasmissione neuromuscolare.
• La proteina ha un peso molecolare previsto di circa 83 kDa, coerente con l'osservazione validata del prodotto sul Western blot.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• La sequenza dell'immunogeno (amminoacidi 649‑748) risiede in una regione ben conservata tra umano, topo e ratto, spiegando l'ampia reattività crociata. Considerare questo aspetto quando si analizzano i risultati tra specie.
• Per il Western blot, eseguire i campioni in condizioni riducenti e aspettarsi una banda specifica vicino a 83 kDa. Utilizzare una membrana PVDF a bassa fluorescenza per una rilevazione ottimale.
• I protocolli ELISA possono impiegare questo anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento; titolare con cura contro la proteina ChAT ricombinante o lisati tissutali nativi.
• Eseguire il bloccaggio con il 5% di latte scremato o BSA in TBST e incubare l'anticorpo primario durante la notte a 4°C per il miglior rapporto segnale-rumore.
• Validare sempre l'anticorpo nella propria matrice di campione specifica (ad es., omogenato cerebrale, preparazioni di terminali nervosi) prima dei saggi quantitativi.

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