Anticorpo policlonale Anti-CHD4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14839

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CHD4

• CHD4 (proteina 4 legante il DNA cromodominio-elicasi), nota anche come Mi2-beta, è un rimodellatore della cromatina dipendente da ATP che lega e modifica il DNA nucleosomiale. Riferimenti correlati: PMID:28977666 PMID:32543371
• È una componente fondamentale del complesso NuRD (Rimodellamento dei nucleosomi e deacetilasi), che combina il rimodellamento della cromatina con la deacetilazione degli istoni per regolare la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:16428440 PMID:17626165 PMID:28977666
• CHD4 viene reclutata alle rotture doppio filamento del DNA tramite ZMYND8, dove favorisce la repressione trascrizionale e promuove la riparazione per ricombinazione omologa. Riferimenti correlati: PMID:25593309
• La proteina è coinvolta nella neurogenesi, anche se i dettagli meccanicistici devono essere ancora completamente chiariti.
• CHD4 contiene due cromodomini, un dominio centrale ATPasi/elicasi e molteplici motivi a dito di zinco, che le conferiscono attività di legame al DNA e rimodellamento dei nucleosomi.
• Si localizza prevalentemente nel nucleo, ma viene rilevata anche nel citoplasma e nel centrosoma/centro di organizzazione dei microtubuli.
• Le modifiche post-traduzionali come acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione possono modulare la stabilità, la localizzazione e le interazioni della CHD4.
• CHD4 è ampiamente espressa in tutti i tessuti umani, a riprova del suo ruolo fondamentale nella regolazione della cromatina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1520-1690 della regione C-terminale della CHD4 umana. Questo segmento è conservato nel topo e nel ratto, in linea con la reattività incrociata riportata.
• Per Western blot, aspettarsi una banda a circa 218 kDa. Utilizzare un gel a bassa percentuale (es. 6-8%) e tempi di trasferimento prolungati o trasferimento umido per proteine ad alto peso molecolare.
• Convalidare l'anticorpo nel vostro specifico tipo di campione e nelle condizioni di fissaggio per IHC-P e IF/ICC. Il recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0) può migliorare il segnale.
• Essendo un anticorpo policlonale, è possibile una variabilità tra lotti; includere controlli appropriati (es. lisati di knockdown o knockout con siRNA) per confermare la specificità.
• Per ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo in base al formato del vostro saggio.

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