Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CHIA per WB ed ELISA - Q9BZP6

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CHIA

• CHIA, o chitinasi acida mammifera, è una glicosidasi (idrolasi) che degrada la chitina e la chitotriosio, e può difendere da nematodi, funghi e altri patogeni.
• È coinvolta nella risposta immunitaria delle cellule T helper di tipo 2 (Th2), contribuendo specificamente all'infiammazione mediata da IL-13 e stimolando la produzione di chemochine da parte delle cellule epiteliali polmonari.
• La proteina promuove la fosforilazione di AKT1, proteggendo le cellule epiteliali polmonari dall'apoptosi; questa funzione è inibita dall'allosamidina, suggerendo una dipendenza dal legame ai carboidrati.
• Localizzata sia nella frazione secreta che nel citoplasma, CHIA è altamente espressa nello stomaco e rilevata a livelli inferiori nel polmone, con livelli elevati nell'epitelio polmonare asmatico.
• La chitinasi contiene un peptide segnale, un dominio catalitico e un dominio di legame alla chitina; le modifiche post-traduzionali includono ponti disolfuro, e lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Le parole chiave UniProt evidenziano la disponibilità della struttura 3D, lo splicing alternativo, i ponti disolfuro e la classificazione come glicosidasi e idrolasi coinvolta nel metabolismo dei carboidrati e nella risposta infiammatoria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la regione N-terminale (aa 1-368) della CHIA umana; pertanto, l'anticorpo può rilevare la proteina a lunghezza intera e frammenti N-terminali. Confermare la specificità della banda nel vostro sistema campione.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 52 kDa; condizioni riducenti possono produrre una banda di queste dimensioni. Utilizzare controlli positivi come lisati di cellule epiteliali di stomaco o polmone umano.
• È riportato che l'anticorpo reagisce in modo crociato con la CHIA di topo e ratto; si raccomanda la validazione in queste specie testando lisati tissutali da stomaco o polmone dove CHIA è espressa.
• Per l'ELISA, utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento dopo aver confermato la reattività con CHIA ricombinante o nativa. Le diluizioni ottimali devono essere determinate empiricamente.
• Poiché l'anticorpo è policlonale, tenere presente la possibile variazione tra lotti e la potenziale reattività con altri membri della famiglia delle chitinasi; può essere considerata la pre-adsorbimento per una maggiore specificità.

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