Anticorpo policlonale coniglio anti-CHIT1 per WB, IHC-P, ELISA - Q13231

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CHIT1

• Il gene CHIT1 codifica la chitotriosidasi-1, una glicoproteina secreta appartenente alla famiglia delle glicosil idrolasi 18, coinvolta nella degradazione della chitina.
• Questa proteina idrolizza la chitina, la chitotriosio e la chitobiosio, svolgendo un ruolo nella difesa contro i patogeni contenenti chitina come i nematodi.
• L'splicing alternativo produce l'isoforma 3, priva di attività enzimatica.
• La localizzazione subcellulare comprende la secrezione nello spazio extracellulare e il compartimento lisosomiale.
• L'espressione tissutale è particolarmente evidente nella milza e nei macrofagi, coerente con una funzione di difesa immunitaria.
• Le modifiche post-traduzionali comprendono la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, essenziali per la stabilità e l'attività.
• Contiene un dominio di legame per la chitina; è classificato tra le idrolasi, nel metabolismo dei carboidrati e nella degradazione dei polisaccaridi.
• Evidenze di sequenziamento proteico diretto supportano la sua identificazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 217–466 della CHIT1 umana, prendendo di mira il dominio catalitico ma escludendo il peptide segnale. Questa regione può rilevare sia le isoforme attive sia l'isoforma 3 cataliticamente inattiva, se l'epitopo è conservato.
• Per il Western blotting (WB), si consiglia di utilizzare lisati di linee cellulari di macrofagi umani o tessuto splenico come controlli positivi. La dimensione della banda attesa è di ~52 kDa; si ricorda che la glicosilazione può causare leggere deviazioni di migrazione.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), testare le prestazioni dell'anticorpo su sezioni di milza umana fissate in formalina e incluse in paraffina con metodi appropriati di recupero dell'antigene.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per quantificare la CHIT1 ricombinante o la proteina endogena nei fluidi biologici; convalidare la misurazione con una curva standard utilizzando proteina purificata.
• La reattività crociata con il topo suggerisce l'utilizzabilità in modelli murini; tuttavia, si raccomanda un allineamento di sequenza per confermare la conservazione dell'epitopo.

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