Anticorpo policlonale anti-Chk1 coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O14757

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Chk1

• Chk1 (Chinasi del checkpoint 1) è una chinasi proteica serina/treonina codificata dal gene CHEK1, che funge da chinasi chiave del checkpoint del ciclo cellulare.
• Necessaria per l'arresto del ciclo cellulare mediato dal checkpoint e l'attivazione della riparzione del DNA in risposta alla presenza di danni al DNA o DNA non replicato. Riferimenti correlati: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Riconosce la sequenza consenso del substrato [R-X-X-S/T] e fosforila CDC25A, CDC25B e CDC25C, portando alla loro inibizione tramite legame 14-3-3 o degradazione proteasomica, bloccando così la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:19734889, PMID:20090422
• Fosforila RAD51 in Thr-309, migliorando la sua associazione alla cromatina per promuovere la riparzione del DNA tramite ricombinazione omologa. Riferimenti correlati: PMID:15665856
• Fosforila TP53 su più siti C-terminali, promuovendo l'attivazione di TP53 tramite acetilazione, portando all'arresto del ciclo cellulare e alla soppressione della proliferazione. Riferimenti correlati: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Modula l'assemblaggio della cromatina fosforilando TLK1, prevenendo la fosforilazione di ASF1A, e partecipa alla riparazione dei crosslink del DNA tramite la fosforilazione di FANCE. Riferimenti correlati: PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:17296736
• Si localizza nel nucleo, cromosoma, citoplasma e centrosoma.
• Espresso ubiquitariamente, con i livelli più alti nel timo, testicolo, intestino tenue e colon.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre una regione centrale conservata (aa 148–307) di Chk1, supportando la reattività crociata con umano, mouse e ratto. Si consiglia la validazione nella specie pertinente.
• Per il Western blotting, è prevista una banda intorno ai 54 kDa. I lisati di timo o testicolo, che esprimono alti livelli di Chk1, possono servire come controlli positivi.
• Quando si eseguono IHC-P o IF/ICC, considerare l'ottimizzazione della fissazione e della permeabilizzazione per migliorare il rilevamento di Chk1 nucleare e centrosomiale.
• L'ELISA può essere utilizzato per quantificare Chk1 in lisati cellulari o preparazioni di proteine ricombinanti; si consiglia la calibrazione rispetto a una curva standard nella matrice specifica.

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