Anti-Chk2 Coniglio Anticorpo Policlonale per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O96017

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Chk2

• Chk2 (Chinasi del checkpoint 2, codificata da CHEK2) è una chinasi proteina serina/treonina che agisce come mediatore centrale della risposta al danno del DNA, fosforilando gli effettori a valle per imporre l'arresto del ciclo cellulare, la riparazione del DNA o l'apoptosi in caso di rotture a doppia elica.
• Fosforila preferenzialmente i substrati nella sequenza consenso [L-X-R-X-X-S/T] (PubMed:37943659). Riferimenti correlati: PMID:37943659
• Chk2 regola i checkpoint G1/S, S e G2/M fosforilando e inibendo le fosfatasi CDC25 (CDC25A, B, C), mantenendo così la fosforilazione inibitoria della tirosina sui complessi CDK-ciclina.
• Promuove la riparazione del DNA tramite ricombinazione omologa fosforilando BRCA2, che potenzia il caricamento di RAD51 sulla cromatina, e stimola la trascrizione dei geni di riparazione tramite l'attivazione di FOXM1.
• Come soppressore tumorale, Chk2 innesca anche l'apoptosi fosforilando p53/TP53 a Ser-20, riducendo la degradazione mediata da MDM2, e attivando il fattore di trascrizione E2F1.
• Chk2 media l'inibizione dipendente da CCAR2 di SIRT1, un processo critico per l'acetilazione di p53 e l'apoptosi (PubMed:25361978). Riferimenti correlati: PMID:25361978
• In condizioni di stress ossidativo, Chk2 fosforila TRIM32 a Ser-55, promuovendo l'ubiquitinazione di ATG7 e regolando positivamente l'autofagia (PubMed:37943659). Riferimenti correlati: PMID:37943659
• Chk2 è localizzato prevalentemente nel nucleo, inclusi i corpi PML e il nucleoplasma, ed è altamente espresso nei testicoli, nella milza, nel colon e nei leucociti del sangue periferico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la regione N-terminale (residui 1-220) di Chk2 umano, che include il dominio della chinasi; considerare l'accessibilità dell'epitopo in diverse condizioni di fissazione e denaturazione.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di ~61 kDa, ma potrebbero apparire bande aggiuntive dovute a splicing alternativo o modificazioni post-traduzionali; validare la specificità utilizzando controlli appropriati.
• Questo anticorpo policlonale è applicabile per immunoprecipitazione ed ELISA; per IF/ICC, si raccomanda l'ottimizzazione dei passaggi di permeabilizzazione e blocco per minimizzare il background.
• Dato che l'attivazione di Chk2 è stimolata dal danno del DNA, il trattamento delle cellule con agenti genotossici (es. etoposide, radiazioni ionizzanti) può potenziare il rilevamento delle forme fosforilate.

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