Anticorpo policlonale Anti-CHMP2B per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UQN3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CHMP2B

• CHMP2B, noto anche come CHMP2.5, proteina 2b di modifica della cromatina o Vps2-2, è una proteina umana codificata dal gene CHMP2B. È unembro della famiglia delle proteine dei corpi multivesicolari carichi e funge da componente centrale del complesso di ordinamento endosomiale richiesto per il trasporto III (ESCRT-III).
• Come parte della macchina ESCRT-III, CHMP2B svolge un ruolo centrale nella formazione dei corpi multivesicolari (MVB) e nell'ordinamento del carico ubiquitinato nelle vescicole intraluminali (ILV) all'interno degli endosomi tardivi. Questo processo indirizza le proteine di membrana, come i recettori dei fattori di crescita attivati, verso la degradazione lisosomiale.
• Il complesso ESCRT-III media eventi di scissione della membrana non solo nella biogenesi degli MVB, ma anche in processi topologicamente equivalenti, inclusa la fase finale di scissione della citochinesi e la gemmazione di virus avvolti come l'HIV-1.
• CHMP2B opera nel citosol ed è reclutato sulla faccia citoplasmatica delle membrane endosomiali tardive, dove si assembla in polimeri dinamici che guidano l'invaginazione e la scissione della membrana in congiunzione con l'ATPasi AAA VPS4.
• Le modifiche post-traduzionali di CHMP2B includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare il suo assemblaggio, la localizzazione e la funzione all'interno della via ESCRT.
• Le parole chiave di UniProt evidenziano il suo coinvolgimento nel trasporto proteico, nella biologia degli endosomi e la sua associazione con malattie neurodegenerative come la sclerosi laterale amiotrofica (SLA) e la demenza frontotemporale.
• La proteina è ampiamente espressa nei tessuti umani, con una presenza notevole nelle regioni cerebrali (cervelletto, corteccia cerebrale, midollo allungato, midollo spinale, ecc.), cuore, muscolo scheletrico, milza, rene, fegato e polmone, riflettendo il suo ruolo fondamentale nella dinamica delle membrane cellulari.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo è una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli amminoacidi 1–213 di CHMP2B umano (NP_054762.2). Questa sequenza copre quasi l'intera lunghezza della proteina (escludendo solo una breve regione C-terminale), il che suggerisce che l'anticorpo potrebbe riconoscere molteplici epitopi.
• Data la sua natura policlonale e il suo design, questo anticorpo è adatto per l'analisi Western blot (WB) di CHMP2B endogeno in campioni umani e murini; è prevista una banda vicino a 24 kDa. Considerare l'inclusione di appropriati controlli positivi e negativi per confermare la specificità.
• Per l'immunofluorescenza (IF) o l'immunocitochimica (ICC), CHMP2B si localizza nel citoplasma con un arricchimento sulle membrane endosomiali tardive. Potrebbe essere necessaria la permeabilizzazione delle preparazioni cellulari per rilevare questo pool associato alla membrana. Validare la colorazione nel sistema cellulare pertinente e considerare la colorazione combinata con marcatori endosomiali.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione quantitativa, ma le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate empiricamente nel sistema di saggio dell'utente.
• È stata riportata la reattività crociata con il topo, rendendo questo anticorpo un candidato per studi traslazionali che utilizzano modelli murini. Tuttavia, gli utenti dovrebbero verificare la reattività con i loro specifici tessuti sperimentali o linee cellulari.

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