Anticorpo policlonale Anti-CHMP6 per WB, IF/ICC, ELISA - Q96FZ7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CHMP6

• CHMP6 (charged multivesicular body protein 6), denominato anche Vps20 o chromatin-modifying protein 6, è una componente centrale probabile del complesso III di ordinamento endosomiale richiesto per il trasporto (ESCRT-III).
• È essenziale per la formazione dei corpi multivesicolari (MVB), e media l'ordinamento delle proteine cariche endosomiali nelle vescicole intraluminali (ILV) destinate alla degradazione lisosomiale.
• Il macchinario ESCRT-III, incluso CHMP6, partecipa a eventi di fissione della membrana topologicamente equivalenti come le fasi terminali della citochinesi e la gemmazione di virus avvolti (ad esempio, HIV-1).
• All'interno del complesso ESCRT-III, CHMP6 agisce probabilmente come accettore per il complesso ESCRT-II sulle membrane endosomiali, facilitando il reclutamento delle subunità a valle dell'ESCRT-III.
• La localizzazione subcellulare include il sistema di membrana endocellulare, la membrana dell'endosoma e la membrana dell'endosoma tardivo, in linea con il suo ruolo nel traffico endosomiale.
• CHMP6 è espressa in modo ubiquitario in tutti i tessuti umani, indicando una funzione fondamentale di housekeeping nella dinamica delle membrane cellulari.
• Le modifiche post-traduzionali includono miristoilazione e fosforilazione; la proteina contiene domini a spirale avvolta critici per l'assemblaggio dei filamenti di ESCRT-III.
• Il peso molecolare previsto è di circa 23,5 kDa (23485 Da), in linea con la banda osservata a 23 kDa nei gel denaturanti.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 111–200 di CHMP6 umana, una regione centrale che può rilevare la proteina full-length e potenziali isoforme; includi controlli adeguati nella progettazione sperimentale.
• Per Western blot (WB), si consiglia l'uso di condizioni riducenti e la validazione con lisati di linee cellulari umane o murine che esprimono CHMP6 endogena.
• Per immunofluorescenza/immunicitochimica (IF/ICC), ottimizza i protocolli di fissazione e permeabilizzazione, poiché le proteine associate a membrana possono richiedere condizioni specifiche per una localizzazione accurata.
• Per ELISA, testa diluizioni seriali di CHMP6 ricombinante o estratti cellulari per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali dell'anticorpo e i limiti di rilevazione.
• La reattività incrociata con uomo e topo è stata confermata; se utilizzi altre specie, esegui un allineamento di sequenza e, se necessario, valida sperimentalmente la reattività.

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