Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CHTF18 per WB, IF/ICC, ELISA - Q8WVB6

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CHTF18

• CHTF18 (proteina omologa 18 di fedeltà di trasmissione cromosomica), nota anche come CHL12, è un fattore chiave nella coesione delle cromatidi sorelle e garantisce una corretta segregazione cromosomica durante la divisione cellulare.
• È un componente integrale del complesso CTF18-RFC (insieme a CTF8, DCC1, RFC2-5), un caricatore alternativo di PCNA che lega DNA innescato e a singolo filamento ed esibisce attività ATPasi DNA-dipendente stimolata da RPA e PCNA.
• Il complesso CTF18-RFC catalizza il caricamento di PCNA dipendente da ATP su DNA con gap e innescato, svolgendo un ruolo critico nei processi di replicazione e riparazione del DNA.
• CHTF18 interagisce direttamente con e stimola la DNA polimerasi POLH, ed è coinvolto nel reclutamento della DNA polimerasi POLE nei siti di danno al DNA locale durante la sintesi di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:20227374
• CHTF18 si localizza prevalentemente nel nucleo, in linea con la sua funzione nel mantenimento del genoma.
• È una fosfoproteina contenente domini di legame per ATP e DNA, e subisce uno splicing alternativo per produrre più isoforme, come indicato da studi di identificazione proteomica e di struttura 3D (Parole chiave UniProt: Struttura-3D, Splicing alternativo, Legame-ATP, Legame-DNA, Legame-nucleotide, Nucleo, Fosfoproteina, Proteoma di riferimento).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 794-975 nella regione C-terminale di CHTF18 umano; verificare la specificità dell'anticorpo in campioni che esprimono isoforme a lunghezza intera e troncate.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è ~107 kDa; utilizzare una percentuale appropriata di gel di poliacrilammide (es. 8-10%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, CHTF18 mostra colorazione nucleare; scegliere protocolli di fissazione e permeabilizzazione che preservino gli antigeni nucleari e validare nella linea cellulare pertinente (es. HeLa o altre cellule umane/di ratto).
• Per l'ELISA, confermare il legame a CHTF18 ricombinante o all'antigene target e titolare la concentrazione dell'anticorpo per stabilire sensibilità e specificità ottimali.

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