Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-cIAP2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13489

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di cIAP2

• La proteina 3 contenente ripetizioni IAP del baculovirus (BIRC3), nota anche come cIAP2, API2 e hIAP1, è un membro della famiglia degli inibitori dell'apoptosi (IAP) caratterizzata dalla presenza di uno o più domini BIR (baculovirus IAP repeat) e un dominio dito di zinco RING.
• Funziona come regolatore multifunzionale dell'apoptosi, della segnalazione infiammatoria e dell'immunità agendo come ligasi E3 ubiquitina-proteina, mediando l'ubiquitinazione di molecole di segnalazione chiave come RIPK1, RIPK2, CASP3, CASP7, CASP8, IKBKE, TRAF1 e BCL10.
• Regola positivamente la segnalazione canonica di NF-kB mentre sopprime l'attivazione costitutiva della via non canonica, bilanciando così le risposte infiammatorie e di sopravvivenza cellulare.
• Svolge un ruolo critico nell'immunità innata regolando i recettori di riconoscimento dei modelli (PRR), inclusi i recettori Toll-like (TLR), i recettori simili a NOD (NLR) e i recettori simili a RIG-I (RLR), influenzando la produzione di citochine a valle.
• Protegge le cellule dall'assemblaggio spontaneo del ripoptosoma, un complesso induttore di morte, ubiquitinando RIPK1 e CASP8.
• Coinvolto nella modulazione della proliferazione, invasione e metastasi cellulare, collegando la sua attività alla biologia del cancro.
• Si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con i suoi diversi ruoli di segnalazione e regolazione.
• Altamente espresso nel polmone e nel rene fetali, e nei tessuti linfoidi adulti inclusi milza, timo e linfociti del sangue periferico, riflettendo la sua importanza nello sviluppo e nella funzione del sistema immunitario.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro gli amminoacidi 100–130 di cIAP2 umano (NP_001156.1), una regione all'interno dei domini BIR; l'anticorpo policlonale risultante dovrebbe riconoscere la proteina a lunghezza intera (~68 kDa) nel Western blot.
• Per il Western blot (WB), utilizzare il 5% di latte scremato o BSA per il blocco e l'incubazione primaria durante la notte a 4°C; dovrebbe essere rilevata una banda a circa 68 kDa. Considerare l'uso di lisati da cellule con espressione nota di cIAP2 (es. linee linfoidi) come controlli positivi.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; validare la specificità della colorazione con sezioni tissutali di milza o timo e confrontare con controlli IgG normali.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), osservare la localizzazione citoplasmatica e nucleare; una colorazione doppia con marcatori di organelli può confermare la distribuzione subcellulare.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e le condizioni di blocco per il formato specifico del saggio.
• È prevista una reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, le prestazioni in queste specie dovrebbero essere verificate sperimentalmente nelle condizioni del vostro saggio.

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