mAb coniglio anti-Citrato sintasi per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75390

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Citrato sintasi

• La proteina bersaglio è la citrato sintasi, un enzima mitocondriale appartenente alla famiglia delle transferasi, in particolare alle aciltransferasi che convertono gruppi acil in gruppi alchilici durante il trasferimento.
• Catalizza la condensazione dell'acetil coenzima A e dell'ossalacetato per formare citrato, il primo passaggio limitante della velocità del ciclo dell'acido tricarbossilico (TCA), una via centrale per la produzione di energia.
• Questo enzima è localizzato esclusivamente nella matrice mitocondriale, dove opera il ciclo TCA, fornendo precursori per la fosforilazione ossidativa.
• Come enzima chiave del ciclo TCA, l'attività della citrato sintasi è spesso utilizzata come marker del contenuto mitocondriale e della capacità ossidativa nei tessuti.
• L'enzima subisce diverse modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione e coniugazione con ubiquitina, che possono modularne l'attività.
• La proteina è stata ampiamente caratterizzata tramite studi cristallografici (struttura 3D disponibile) e sequenziamento proteico diretto, confermando un peso molecolare di circa 52 kDa (~52 kDa calcolati da NP_004068.2).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 28–145 della citrato sintasi umana, una regione probabilmente esposta dopo il processing mitocondriale, indicando che riconosce la forma endogena matura.
• Per il Western blotting è prevista una banda vicino ai 52 kDa; il caricamento di frazioni arricchite di mitocondri o l'utilizzo di lisati cellulari totali da tessuti metabolicamente attivi può migliorare la rivelazione.
• Nell'immunistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), assicurare un recupero antigenico adeguato e considerare la convalida del segnale in tessuti con elevata densità mitocondriale (es. cuore, muscolo scheletrico).
• La reattività crociata dell'anticorpo con la citrato sintasi di topo e ratto permette studi sui comuni modelli preclinici; includere sempre controlli positivi e negativi appropriati per ogni applicazione.
• Per le applicazioni ELISA, le condizioni di rivestimento ottimali e la diluizione dell'anticorpo devono essere determinate empiricamente utilizzando la citrato sintasi ricombinante come standard.

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