Anticorpo policlonale anti-CKAP4 per WB, IF/ICC, ELISA - Q07065

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CKAP4

• La proteina 4 associata al citoscheletro (CKAP4), nota anche come p63, CLIMP-63 o ERGIC-63, è una proteina transmembrana di tipo II da 63–66 kDa localizzata prevalentemente nel reticolo endoplasmatico (RE) rugoso.
• CKAP4 funge da recettore di superficie cellulare epiteliale ad alta affinità per il fattore antiproliferativo (APF), trasducendo segnali antiproliferativi in seguito al legame con il ligando.
• Media l'ancoraggio del RE al citoscheletro dei microtubuli, contribuendo al mantenimento della morfologia del RE e al traffico intracellulare.
• Un ampio dominio citoplasmatico coiled-coil facilita l'oligomerizzazione e l'interazione con i microtubuli, mentre un breve dominio luminale può partecipare alle interazioni proteina-proteina all'interno del RE.
• La distribuzione subcellulare include la membrana del RE, la membrana plasmatica, il citoplasma perinucleare e il citoscheletro; la proteina fa la spola tra il RE e la superficie cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali come fosforilazione, palmitoilazione e acetilazione regolano la funzione, la localizzazione e la stabilità di CKAP4.
• CKAP4 è classificata come una lipoproteina con un segmento transmembrana di ancoraggio del segnale, sottolineando il suo ruolo nella dinamica di membrana.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 130–400, comprendendo il dominio citoplasmatico coiled-coil; questa regione è conservata tra uomo, topo e ratto, supportando la reattività crociata tra le specie.
• Per il western blot (WB), prevedere una banda vicino a 66 kDa; validare la specificità utilizzando linee cellulari con espressione confermata di CKAP4 e controlli appropriati.
• Nell'immunofluorescenza (IF)/ICC, ottimizzare la permeabilizzazione per rilevare sia i pool del RE che quelli della membrana plasmatica; co-colorare con marcatori di organelli (es. calnexina per il RE) per confermare la localizzazione.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'uso della proteina CKAP4 ricombinante come standard; considerare le condizioni di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo per un segnale ottimale.
• Verificare le prestazioni dell'anticorpo nel sistema di campioni pertinente, poiché l'accessibilità dell'epitopo può variare con la fissazione o il contesto proteico.

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