Anticorpo policlonale coniglio anti-CKAP5 per WB, IP, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q14008

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CKAP5

• CKAP5 (Proteina 5 associata al citoscheletro), nota anche come ch-TOG (Proteina del gene sovraespresso nei tumori colici ed epatici), è una grande proteina associata ai microtubuli codificata dal gene CKAP5 (GeneID: 9793) con un peso molecolare previsto di ~225 kDa.
• Agisce come una polimerasi processiva dei microtubuli, legandosi alle estremità positive dei microtubuli e promuovendo la nucleazione e l'allungamento dei microtubuli citoplasmatici.
• CKAP5 svolge un ruolo critico nell'assemblaggio del fuso mitotico organizzando i poli del fuso e proteggendo i microtubuli del cinetocore dalla depolimerizzazione.
• È un componente del complesso TACC3/ch-TOG/clatrina, che stabilizza le fibre del cinetocore del fuso mitotico agendo come un ponte inter-microtubulare. Riferimenti correlati: PMID:23532825
• CKAP5 potenzia la forza degli attacchi microtubulo-punta del cinetocore mediati dal complesso NDC80. Riferimenti correlati: PMID:27156448
• A livello subcellulare, CKAP5 si localizza nel citoplasma, al centrosoma, ai poli del fuso e ai cinetocori durante la divisione cellulare.
• L'espressione è elevata nei tumori epatici e colici, nonché nei corpi cellulari delle cellule di Purkinje del cervelletto, con una distribuzione tissutale diffusa che include muscolo scheletrico, cervello, cuore, placenta, polmone, fegato, rene e pancreas.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, e lo splicing alternativo genera multiple isoforme.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1763-2032 del CKAP5 umano; pertanto, l'anticorpo potrebbe riconoscere epitopi all'interno di questa regione C-terminale. Si consiglia di utilizzare controlli positivi appropriati (es. lisati cellulari HeLa, HEK293) per la WB.
• A causa dell'elevato peso molecolare (225 kDa), assicurarsi di utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati per il Western blotting.
• Per le applicazioni di immunofluorescenza, ci si aspettano pattern di colorazione coerenti con le reti di microtubuli, i centrosomi e i fusi mitotici. La colorazione combinata con marcatori del centrosoma (es. γ-tubulina) può aiutare a confermare la localizzazione.
• Data la sua natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata e si raccomanda la titolazione dell'anticorpo per un rapporto segnale-rumore ottimale.

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