Anticorpo monoclonale rabbit Anti-CKM/CKB per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P06732

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della creatin chinasi di tipo M (CKM)

• CKM (creatin chinasi di tipo M), noto anche come M-CK o CPK-M, è un enzima chiave nel metabolismo energetico cellulare (UniProt: P06732).
• Catalizza reversibilmente il trasferimento di un gruppo fosfato tra ATP e fosfocreatina, mantenendo i livelli di ATP nei tessuti con fabbisogni energetici elevati e fluttuanti, come muscolo scheletrico, cuore e cervello.
• CKM appartiene alla famiglia delle creatin chinasi, che comprende isoforme citosoliche e mitocondriali, ognuna con distribuzioni tessuto-specifiche.
• La proteina è localizzata prevalentemente nel citoplasma, dove facilita il buffering energetico rapido e il trasporto di energia.
• CKM è una fosfoproteina soggetta a modifiche post-traduzionali che possono regolarne l'attività e la localizzazione subcellulare.
• Le parole chiave di UniProt sottolineano i suoi ruoli nel legame con ATP, legame con nucleotidi, attività chinasi e segnalazione da fosfoproteine.
• Il peso molecolare canonico di CKM è di circa 43 kDa, in linea con la progettazione dell'immunogeno.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 3-381 di CKM umano (NP_001815.2), coprendo quasi l'intera lunghezza della proteina, quindi l'anticorpo riconosce la conformazione nativa.
• Per Western blot, una diluizione iniziale di 1:1000 è spesso adatta, ma si raccomanda l'ottimizzazione per il tipo di campione e il sistema di rilevamento specifici.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), la permeabilizzazione con 0,1% di Triton X-100 è generalmente compatibile; i campioni fissati possono beneficiare dell'ottimizzazione del recupero dell'antigene.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), è possibile testare il recupero dell'epitopo indotto da calore in tampone citrato (pH 6,0); la diluizione dell'anticorpo deve essere determinata empiricamente.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con CKM di topo e ratto, come indicato, quindi è adatto per studi su modelli roditori.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, lisati di tessuti ricchi di CKM, campioni knockout/knockdown) per confermare la specificità.

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