Anticorpo monoclonale di coniglio anti-caspasi-1 p20 clivata per WB, ELISA - P29466

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della caspasi-1

• La caspasi-1 è una proteasi tiolica appartenente alla famiglia delle caspasi, codificata dal gene CASP1 (noto anche come IL1BC, ICE). Viene sintetizzata come zimogeno inattivo (p45), che viene processato proteoliticamente nelle subunità attive p20 e p10.
• Svolge un ruolo centrale nelle risposte infiammatorie, scindendo le forme precursori dell'interleuchina-1 beta (pro-IL1B) e dell'interleuchina-18 (pro-IL18) nelle loro citochine mature biologicamente attive, in seguito all'assemblaggio dei complessi dell'inflammasoma. Riferimenti correlati: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• Inoltre, la caspasi-1 avvia la piroptosi, una forma litica di morte cellulare programmata, scindendo la Gasdermina-D (GSDMD) e generando un frammento N-terminale che forma pori nella membrana. Riferimenti correlati: PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Durante un'infezione batterica, la caspasi-1 scinde e attiva la caspasi-7 (CASP7), contribuendo alla riparazione della membrana plasmatica. Riferimenti correlati: PMID:22464733
• Nell'immunità antivirale, la caspasi-1 controlla le risposte indotte dai virus a DNA scindendo e inattivando la sintasi del ciclico GMP-AMP (CGAS). Riferimenti correlati: PMID:28314590
• La localizzazione subcellulare comprende il citoplasma e la membrana cellulare, in linea con il suo ruolo nell'elaborazione delle citochine e nell'esecuzione della piroptosi.
• L'espressione tissutale è ampia, con livelli più elevati nella milza e nei polmoni e quantità rilevabili nel fegato, nel cuore, nell'intestino tenue, nel colon, nel timo, nella prostata, nel muscolo scheletrico, nei leucociti del sangue periferico, nei reni e nei testicoli; l'espressione è assente nel cervello.
• La proteina è soggetta a splicing alternativo e alla formazione di legami isopeptidici, mentre la sua attivazione comprende un processamento autoproteolitico intermolecolare; appartiene alla famiglia delle peptidasi C14A.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno di questo anticorpo monoclonale è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 200–300 all'interno della subunità p20 della caspasi-1 umana. Si prevede che questa regione sia accessibile nella forma clivata e attiva dell'enzima.
• Per l'analisi mediante Western blot (WB), preparare lisati cellulari o tissutali in condizioni riducenti. Considerare l'uso di induttori noti dell'attivazione della caspasi-1 (ad esempio, attivatori dell'inflammasoma NLRP3 come nigericina o ATP) per osservare il frammento p20 clivato. Si prevede una banda di circa 20 kDa, insieme a potenziali forme pro a lunghezza intera o intermedie.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o la rilevazione della caspasi-1 p20 clivata nel siero umano, nel plasma o nei surnatanti di colture cellulari; la diluizione ottimale e l'abbinamento devono essere determinati empiricamente.
• Non è stata riportata reattività crociata con altre specie; validare l'anticorpo nei sistemi di campionamento pertinenti qualora vengano utilizzate specie diverse da quella umana.
• Considerando i molteplici pesi proteici riportati (10/29/35/42/45 kDa), questi probabilmente rappresentano diversi intermedi di clivaggio e isoforme; confermare l'identità delle bande rilevate utilizzando controlli appropriati (ad esempio, campioni non trattati rispetto a campioni attivati).

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