Anticorpo monoclonale coniglio Anti-Cleaved-Caspase 3 p12 per WB, ELISA - P42574

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Caspasi-3

• La caspasi-3, nota anche come Apopain, CPP32, Yama o SCA-1, è una proteasi tiolica e una delle principali caspasi effettrici che eseguono l'apoptosi seguendo l'attivazione da parte delle caspasi iniziatrici (CASP8, CASP9, CASP10).
  Riferimenti correlati: PMID:18723680 PMID:20566630 PMID:23650375
• Una volta attivata, cliva numerosi substrati tra cui PARP1 in Asp216-Gly217, SREBPs, caspasi-6, -7, -9 e IL18, orchestrando così il smantellamento cellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:10497198 PMID:16374543 PMID:7596430 PMID:37993714 PMID:9334240
• Oltre all'apoptosi, contribuisce alla piroptosi clivando la gasdermina-E (GSDME), inibisce la produzione di interferoni di tipo I durante l'infezione virale prendendo di mira CGAS, IRF3 e MAVS, e media l'esposizione della fosfatidilserina tramite le scramblasi della famiglia XKR.
  Riferimenti correlati: PMID:35338844 PMID:35446120 PMID:30878284 PMID:23845944 PMID:33725486
• La caspasi-3 è principalmente localizzata nel citoplasma ed è altamente espressa nel polmone, milza, cuore, fegato e rene, con livelli moderati nel cervello e nel muscolo scheletrico, e l'espressione più alta nelle cellule del sistema immunitario.
• La sua attività è regolata dal clivaggio proteolitico dallo zimogeno inattivo alle subunità attive p12 e p17, e subisce modificazioni post-traduzionali come fosforilazione, acetilazione e S-nitrosilazione.
• Il clivaggio mediato dalla caspasi-3 della huntingtina è implicato nella patologia della malattia di Huntington, e cliva anche proteine di adesione cellulare come DSG2 e JUP per facilitare il distacco cellulare apoptotico.
  Riferimenti correlati: PMID:8696339 PMID:17559062

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde alla subunità p12 della caspasi-3 clivata (amminoacidi 171–270); pertanto, ci si aspetta che riconosca la forma clivata attiva con alta specificità rispetto alla pro-caspasi-3 a lunghezza intera. Tuttavia, verificare la specificità dello stato di clivaggio nel proprio sistema.
• Per l'analisi Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari indotti all'apoptosi (es. trattamento con staurosporina o etoposide) per rilevare il frammento clivato p12; ottimizzare le condizioni di carico e trasferimento per questa proteina a basso peso molecolare.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo monoclonale può essere adatto come reagente di rilevamento se abbinato a un anticorpo di cattura che riconosce un epitopo diverso; assicurarsi della corretta validazione della coppia di anticorpi nel proprio saggio.
• L'anticorpo è validato per campioni umani; la reattività crociata con altre specie non è stata determinata, quindi confermare la reattività se utilizzato con campioni non umani.
• Come anticorpo monoclonale di coniglio, offre una ridotta variabilità da lotto a lotto; ciononostante, ogni nuovo lotto dovrebbe essere testato nella specifica applicazione.

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