Anticorpo monoclonale di coniglio contro Gasdermina D clivata (N-terminale) per la ricerca sulla piroptosi - P57764

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Gasdermina D

• Precursore di una proteina porogena che, dopo la clivatura da parte delle caspainfiammatorie, rilascia un frammento N-terminale che si lega alle membrane e forma pori, innescando la piroptosi. Riferimenti correlati: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27281216
• Promuove la piroptosi in risposta a infezioni microbiche e segnali di pericolo; viene clivato da CASP1, CASP4 o CASP5; si trasloca sulla membrana plasmatica, si lega ai lipidi del foglietto interno e forma pori di 10–15 nm, consentendo il rilascio di IL1B maturo, IL18 e CASP7. Riferimenti correlati: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190 PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980 PMID:33472215 PMID:37198476
• Media l'attivazione non canonica dell'inflammasoma in risposta a LPS citosolico; forma inoltre pori nelle membrane mitocondriali, rilasciando mtDNA, e i frammenti N-terminali extracellulari uccidono direttamente i batteri grazie alla specificità di legame con i lipidi. Riferimenti correlati: PMID:27281216
• Agisce come coattivatore trascrizionale nell'intestino tenue dopo la clivatura da parte di CASP3/CASP7; si trasloca nel nucleo, coattiva STAT1 per indurre CIITA e MHC di classe II, promuovendo la tolleranza alimentare mediata dalle cellule Tr1.
• Viene clivato dall'allergene papaïna, portando alla formazione di pori sulla membrana plasmatica e al rilascio specifico di IL33, che guida una risposta infiammatoria di tipo 2. Riferimenti correlati: PMID:35794369
• Espresso nelle cellule soprabasali dell'esofago e nell'istmo/collo, nella fossa e nella ghiandola dello stomaco, indicando un'espressione preferenziale nelle cellule in differenziazione.
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, citosol, inflammasoma, membrana cellulare, ambiente secretorio, membrana mitocondriale e nucleo; le modificazioni post-traduzionali comprendono palmitoilazione, fosforilazione e ubiquitinazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il sito di clivaggio in Asp275; pertanto l'anticorpo riconosce selettivamente il frammento N-terminale clivato anziché la GSDMD a lunghezza intera. Confermare la specificità utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.
• Per Western blot, eseguire la corsa dei campioni in condizioni riducenti e ricercare una banda intorno a 30 kDa (frammento N-terminale). Convalidare utilizzando lisati di cellule in corso di piroptosi (es. trattamento con LPS+ATP).
• Per immunofluorescenza/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione. Il frammento N-terminale può localizzarsi sulla membrana plasmatica o sui mitocondri nelle cellule piroptotiche.
• Per applicazioni ELISA, considerare accoppiamenti sandwich con un anticorpo di cattura che bersaglia un epitopo diverso. Convalidare le prestazioni utilizzando proteine GSDMD ricombinanti o materiale derivato da cellule.

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