Anticorpo policlonale di coniglio anti-CLEC2D per WB e ELISA - Q9UHP7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CLEC2D

• CLEC2D (membro D della famiglia dei domini lectina di tipo C, C-type lectin domain family 2 member D), noto anche come LLT1, OCIL o CLAX, è un recettore transmembrana appartenente alla superfamiglia delle lectine di tipo C. È codificato dal gene CLEC2D e esiste in più isoforme grazie allo splicing alternativo.
• Agisce come recettore per KLRB1 (CD161) sulle cellule natural killer (NK), inibendo la citotossicità mediata dalle cellule NK e proteggendo le cellule bersaglio dalla lisi.
  Riferimenti correlati: PMID:16339513, PMID:20843815
• Funge da regolatore negativo del rimodellamento osseo inibendo la formazione di osteoclasti e il riassorbimento osseo.
  Riferimenti correlati: PMID:14753741, PMID:15123656
• Modula le risposte immunitarie regolando il rilascio di interferone-gamma, collegando l'immunità innata all'omeostasi ossea.
  Riferimenti correlati: PMID:15104121
• Si lega ai glicosaminoglicani solfatati ad alto peso molecolare, e ciò può mediare le sue interazioni con i componenti della matrice extracellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:15123656
• Si localizza prevalentemente sulla membrana cellulare, ma viene rilevato anche nel reticolo endoplasmatico, coerente con il suo ruolo di recettore di segnalazione transmembrana.
• È espresso nei leucociti del sangue periferico, linfonodi, timo e milza, con isoforme presenti nelle cellule T, cellule B e a livelli inferiori nelle cellule NK e cellule dendritiche.
• Presenta un tipico dominio simile alla lectina di tipo C, una topologia transmembrana con segnale di ancoraggio, legami disolfuro e glicosilazione N-linked, come indicato dall'analisi della sequenza e dai dati strutturali (parole chiave UniProt).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 60–154 di CLEC2D umano (NP_037401.1), corrispondenti al dominio extracellulare simile alla lectina di tipo C; si prevede che l'anticorpo riconosca CLEC2D nativo esposto sulla superficie. Per applicazioni che richiedono la rilevazione della proteina endogena, considerare la validazione in linee cellulari pertinenti (es. cellule NK, cellule B, osteoblasti) o popolazioni di cellule primarie.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è ~22 kDa in base alla sequenza amminoacidica; tuttavia, la glicosilazione può determinare una massa molecolare apparente maggiore. Includere controlli positivi appropriati e marcatori di peso molecolare. L'anticorpo può anche rilevare isoforme derivate da splicing alternativo.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; l'immunogeno ricombinante (aa 60–154) può essere utilizzato come standard. È stata riportata reattività crociata con CLEC2D di topo, ma l'omologia della sequenza deve essere verificata se utilizzato in modelli murini.
• Se utilizzato in immunofluorescenza o citometria a flusso, la permeabilizzazione può essere necessaria per accedere alle pools localizzate nel reticolo endoplasmatico intracellulare, mentre la colorazione di superficie può essere eseguita su cellule vive non permeabilizzate.
• Ottimizzare sempre empiricamente la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione per ogni applicazione e tipo di campione. Questo anticorpo è fornito come siero policlonale e può presentare variabilità tra lotti; la coerenza deve essere verificata nei saggi critici.

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