Anticorpo Policlonale Anti-CLEC4D per WB, IF-P, ELISA - Q8WXI8

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CLEC4D

• Noto anche come Dectin-3, CD368 e CLECSF8, CLEC4D è un membro della famiglia delle lectine di tipo C che funge da recettore di riconoscimento di pattern (PRR) nel sistema immunitario innato.
• CLEC4D riconosce pattern molecolari associati a danno (DAMP) e pattern molecolari associati a patogeni (PAMP) provenienti da batteri e funghi, inclusi gli α-mannani sulle ife di Candida albicans e il 6,6'-dimicolato di trealosio micobatterico (TDM). Riferimenti correlati: PMID:23602766 PMID:23911656
• Dopo il legame con il ligando, CLEC4D probabilmente forma un complesso con la catena gamma del recettore Fc (FCER1G) tramite CLEC4E (Mincle), portando alla fosforilazione del motivo ITAM, all'attivazione di SYK-CARD9-NF-kB e alla successiva maturazione delle cellule presentanti l'antigene con induzione delle risposte T-helper 1 e 17. Riferimenti correlati: PMID:23602766 PMID:23911656
• CLEC4D agisce come recettore endocitico che può facilitare l'assorbimento dell'antigene nei siti di infezione per la clearance o per l'elaborazione e la presentazione alle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:14971047
• A livello subcellulare, CLEC4D si localizza sulla membrana cellulare come proteina transmembrana con una singola elica segnale-ancora.
• L'espressione tissutale è predominante in monociti e macrofagi, e può essere aumentata da citochine come IL-6, IL-10, TNF e IFN-gamma.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione N-legata e la formazione di ponti disolfuro, che contribuiscono alla sua stabilità strutturale e alle proprietà di legame del ligando.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 39–215 di CLEC4D umano (NP_525126.2); pertanto, l'anticorpo policlonale può riconoscere il dominio extracellulare di legame del ligando e potenzialmente la regione del gambo. Considerare che la glicosilazione potrebbe influenzare l'accessibilità dell'epitopo.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~25 kDa, ma le forme glicosilate possono migrare più in alto. Utilizzare controlli positivi appropriati come cellule THP-1 stimolate con citochine (ad es. TNF o IFN-gamma) per aumentare l'espressione di CLEC4D.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), si prevede che l'anticorpo rilevi CLEC4D localizzato sulla membrana. La permeabilizzazione è necessaria se l'epitopo è intracellulare; altrimenti, è possibile valutare la colorazione di superficie su cellule vive non fissate.
• Per l'ELISA, assicurarsi che la proteina ricombinante o l'antigene nativo siano adeguatamente adsorbiti e considerare la reattività crociata con gli omologhi di topo e ratto durante la progettazione dei saggi.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, la consistenza da lotto a lotto dovrebbe essere monitorata e la specificità può essere verificata utilizzando campioni knockout o knockdown per CLEC4D.

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