Anticorpo policlonale anti-Clusterin per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P10909

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Clusterina

• La Clusterina (apolipoproteina J, TRPM-2, SGP-2) è una glicoproteina multifunzionale codificata dal gene CLU; esiste in forme secretorie e intracellulari a causa dello splicing alternativo e del processing post-traduzionale.
• Come chaperone extracellulare, la clusterina previene l'aggregazione di proteine non native e denaturate da stress, inibisce la formazione di fibrille amiloidi e mantiene le proteine parzialmente srotolate per il ripiegamento da parte di altri chaperone in modo indipendente dall'ATP. Riferimenti correlati: PMID:11123922, PMID:19535339, PMID:12176985, PMID:17260971, PMID:12047389, PMID:17407782, PMID:17412999
• Il legame della clusterina ai recettori di superficie cellulare innesca l'internalizzazione e la degradazione lisosomiale/proteasomiale del complesso chaperone-cliente. Riferimenti correlati: PMID:21505792
• Protegge le cellule dalla citolisi mediata dal complemento inibendo l'assemblaggio del complesso di attacco di membrana (MAC) attraverso la prevenzione della polimerizzazione di C9. Riferimenti correlati: PMID:2780565, PMID:1903064, PMID:2601725
• La clusterina intracellulare interagisce con le ligasi E3 SCF per promuovere l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomiale di bersagli come COMMD1 e IKBKB, e modula l'attività trascrizionale di NF-κB. Riferimenti correlati: PMID:20068069, PMID:12882985
• Una forma mitocondriale sopprime il rilascio di citocromo c dipendente da BAX e stabilizza l'integrità della membrana mitocondriale per inibire l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:16113678, PMID:17689225, PMID:22689054
• La localizzazione subcellulare include la secrezione nei fluidi biologici, nonché la presenza nel citoplasma, nucleo, mitocondri, reticolo endoplasmatico e vescicole citoplasmatiche.
• La clusterina è espressa ubiquitariamente con alti livelli nel cervello, testicolo, ovaio, fegato e pancreas; rilevata nel plasma sanguigno, liquido cerebrospinale, latte, plasma seminale e mucosa del colon.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• A causa della natura policlonale e dell'uso di un immunogeno ricombinante, si prevede che questo anticorpo rilevi sia la forma precursore che quella matura della clusterina; includere controlli appropriati e marcatori di peso molecolare.
• Per il Western blotting, si raccomanda l'ottimizzazione del blocco e della diluizione dell'anticorpo; considerare l'esecuzione di SDS-PAGE sia riducente che non riducente a causa della presenza di legami disolfuro nella clusterina.
• Nell'immunoistochimica e nell'immunofluorescenza, convalidare con campioni tissutali noti positivi e negativi; il recupero dell'antigene può migliorare il rilevamento nelle sezioni incluse in paraffina e fissate in formalina.
• Dato che la clusterina è una glicoproteina secretoria, assicurarsi di lavare accuratamente per ridurre l'elevato background nei campioni contenenti siero.
• La cross-reattività riportata con topo e ratto consente l'uso attraverso comuni modelli preclinici; tuttavia, verificare la conservazione dell'epitopo per confronti quantitativi.
• Titolare sempre l'anticorpo nel proprio sistema di saggio specifico per determinare la diluizione di lavoro ottimale.

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