Anticorpo policlonale di coniglio anti-CMAS per WB ed ELISA - Q8NFW8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della CMAS (citidililtransferasi dell'N-acilneuraminato)

• La CMAS (sintasi dell'acido CMP-N-acetilneuraminico, nota anche come CSS) è una nucleotidiltransferasi che catalizza l'attivazione dell'acido N-acetilneuraminico (NeuNAc) a CMP-NeuNAc, un substrato fondamentale per la sialilazione dei glicoconiugati. Presenta inoltre una bassa attività nei confronti dell'acido N-glicolilneuraminico (Neu5Gc) e dell'acido 2-cheto-3-deossi-D-glicero-D-galatto-nononico (KDN).
• L'enzima appartiene alla famiglia delle transferasi, in particolare alle nucleotidiltransferasi, ed è essenziale per la biosintesi dei glicani contenenti acido sialico nel Golgi e nel nucleo.
• Lo splicing alternativo del gene CMAS genera molteplici varianti trascrizionali e la proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione e metilazione, che possono regolarne l'attività o la localizzazione.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare, coerentemente con il suo ruolo nella sintesi dell'acido CMP-sialico all'interno del nucleo.
• La CMAS è espressa ubiquitariamente nei tessuti umani, con rilevamento in pancreas, reni, fegato, muscolo scheletrico, polmoni, placenta, cervello, cuore, colon, leucociti del sangue periferico, intestino tenue, ovaie, testicoli, prostata, timo e milza.
• Il peso molecolare calcolato della proteina a lunghezza intera è di circa 48,4 kDa (UniProt: 48379 Da), in accordo con la banda osservata nelle applicazioni di Western blot.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato era una proteina di fusione ricombinante comprendente gli amminoacidi 1–263 della CMAS umana. Questa regione N-terminale è altamente conservata e si prevede che generi anticorpi in grado di riconoscere la proteina a lunghezza intera.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare un carico di proteine totali di 20–50 µg per pozzetto e di verificare la banda a ~48 kDa. La specificità può essere confermata mediante knockdown con siRNA o utilizzando lisati cellulari con CMAS knockout, se disponibili.
• Nell'ELISA, l'immunogeno ricombinante o la proteina CMAS purificata possono fungere da controllo positivo per verificare il legame dell'anticorpo. A causa della natura policlonale, è necessario monitorare la coerenza tra i diversi lotti.
• L'anticorpo reagisce crociatamente con la CMAS di topo e ratto; tuttavia, gli utenti devono verificare le prestazioni nei propri sistemi sperimentali specifici a causa di possibili variazioni degli epitopi dipendenti dalla specie.

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