Anticorpo policlonale coniglio anti-CNOT1 per WB, IF/ICC, ELISA - A5YKK6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CNOT1

• CNOT1 è la grande subunità di impalcatura del complesso CCR4-NOT, una principale deadenilasi cellulare dell'mRNA coinvolta nella degradazione massiva dell'mRNA, nella repressione mediata da miRNA e nel controllo traduzionale.
• La proteina funge da repressore trascrizionale, inibendo l'attivazione trascrizionale dipendente da ligando da parte dei recettori nucleari.
• CNOT1 media il reclutamento del complesso CCR4-NOT ai bersagli miRNA attraverso l'associazione con le proteine TNRC6 (GW182), collegandolo al complesso RISC.
• È coinvolto nella degradazione degli mRNA contenenti elementi ricchi in AU (ARE), probabilmente attraverso l'interazione con ZFP36.
• A livello subcellulare, CNOT1 si localizza nel citoplasma, nei corpi P e nel nucleo, coerentemente con i suoi ruoli nel decadimento dell'mRNA e nella regolazione della trascrizione.
• La proteina è fortemente espressa nel cervello, cuore, timo, milza, rene, fegato, placenta e polmone, con un'espressione più debole nel muscolo scheletrico e nel colon.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e le varianti associate alla malattia sono state collegate a disturbi dello spettro autistico, oloprosencefalia e disabilità intellettiva.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 2137–2376 all'interno della regione C-terminale di CNOT1 umano. Verificare la specificità dell'anticorpo nel proprio sistema, poiché il riconoscimento dell'epitopo può differire tra gli isoformi.
• Per il Western blotting, notare che CNOT1 ha un peso molecolare elevato (~267 kDa). Utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6%) e tempi di trasferimento prolungati per un trasferimento completo della proteina.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ci si aspetta una colorazione sia citoplasmica che nucleare, con un possibile arricchimento nei corpi P. Gli studi di co-localizzazione con marcatori dei corpi P possono essere informativi.
• La reattività crociata è confermata per CNOT1 umano e murino. Se si lavora con altre specie, convalidare sperimentalmente la reattività crociata.

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