Anticorpo policlonale anti-CNOT8 per WB, ELISA - Q9UFF9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CNOT8

• CNOT8 (subunità 8 del complesso di trascrizione CCR4-NOT), nota anche come proteina simile a CAF1, CAF2 o Caf1b, è un componente catalitico del complesso multi-subunità CCR4-NOT.
• Possiede attività esoribonucleasica poli(A) 3'-5', contribuisce alla degradazione dell'mRNA dipendente dalla deadenilazione e svolge un ruolo nel turnover delle masse di mRNA.
• CNOT8 partecipa al silenziamento genico mediato da miRNA, dove interviene nella repressione traduzionale nella fase di iniziazione, oltre che nella regolazione generale della trascrizione.
• La sua attività enzimatica è parzialmente ridondante rispetto a quella della strettamente correlata CNOT7 (Caf1a), evidenziando una sovrapposizione funzionale all'interno del complesso CCR4-NOT.
• CNOT8 si associa alle proteine della famiglia BTG come TOB1 e BTG2; questa interazione è necessaria per l'attività antiproliferativa di queste proteine BTG.
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, coerente con i suoi ruoli nella degradazione citoplasmatica dell'mRNA e negli eventi di trascrizione nucleare.
• Il gene CNOT8 subisce splicing alternativo, generando più isoforme, e la proteina contiene un dominio nucleasico DEDD legante metalli caratteristico della famiglia CAF1 di esonucleasi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per Western blot, la banda attesa è di circa 34 kDa; si consiglia di utilizzare controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, lisati con sovraespressione o silenziamento di CNOT8) per confermare la specificità.
• In ELISA, titrare l'anticorpo per ottimizzare l'intervallo di rilevazione e il rapporto segnale/rumore; la reattività crociata con campioni di topo è stata riportata ma deve essere validata nel proprio test.
• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–292, corrispondenti a quasi tutta la lunghezza della proteina; pertanto l'anticorpo può riconoscere più isoforme di splicing se condividono questa regione: verificare nel sistema di campionamento corrispondente.
• Si consiglia di testare questo anticorpo in altre applicazioni come immunoprecipitazione o immunocitochimica dopo validazione interna, data la sua natura policlonale e la localizzazione del bersaglio.

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