Anticorpo monoclonale anti-COL11A1 per WB, IF/ICC, ELISA - P12107

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di COL11A1

• COL11A1 codifica per la catena alfa-1 del collagene di tipo XI, un collagene fibrillare minore che svolge un ruolo cruciale nell'assemblaggio e nel mantenimento della matrice extracellulare della cartilagine regolando la crescita laterale delle fibrille di collagene II.
• La proteina è secreta e si localizza nello spazio extracellulare e nella matrice extracellulare (UniProt: P12107).
• Presenta un'espressione tessuto-specifica: abbondante nella cartilagine, nella placenta e in alcune linee cellulari tumorali o trasformate da virus. Lo splicing alternativo genera isoforme con esone IIA o IIB nella cartilagine, mentre il tendine esprime solo l'isoforma con esone IIB.
• COL11A1 subisce estese modifiche post-traduzionali, inclusa glicosilazione e idrossilazione, e contiene ponti disolfuro e siti di legame per il calcio, contribuendo alla sua stabilità strutturale.
• Mutazioni in COL11A1 sono associate a uno spettro di disturbi del tessuto connettivo, inclusa la sindrome di Stickler, la sordità non sindromica (DFNA37), la cataratta, il nanismo e la displasia ectodermica.
• La proteina ha un peso molecolare previsto di circa 181 kDa, ma le multiple isoforme e i processi di maturazione producono varianti che vanno da 167 a 182 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una specifica sequenza peptidica (aa 301–400); confermare la conservazione di questo epitopo se si estende l'uso ad altre specie o isoforme.
• Per il Western blot, utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6–8%) e condizioni di trasferimento ottimizzate per proteine ad alto peso molecolare; bande multiple potrebbero riflettere la diversità delle isoforme.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, includere passaggi di permeabilizzazione per accedere al collagene localizzato nella matrice extracellulare e validare con marcatori specifici per la matrice.
• Per l'ELISA, considerare l'uso di un formato sandwich con una coppia abbinata o ottimizzare le condizioni di rivestimento a causa della natura glicosilata e di grandi dimensioni dell'antigene.
• La preparazione del campione per l'estrazione del collagene da tessuto spesso beneficia di trattamenti con pepsina o altre proteasi per rilasciare fibrille intatte; notare che ciò potrebbe alterare gli epitopi.

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