Anticorpo policlonale anti-COL11A1 per WB, IHC-P, ELISA - P12107

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di COL11A1

• La catena alfa-1(XI) del collagene è un componente del collagene di tipo XI, un collagene fibrillare minore essenziale per l'integrità strutturale della matrice extracellulare della cartilagine.
• Svolge un ruolo importante nella fibrillogenesi controllando la crescita laterale delle fibrille di collagene II e regolando quindi il diametro delle fibrille.
• È localizzata a livello subcellulare nello spazio e nella matrice extracellulare secreti, in accordo con il suo ruolo nell'impalcatura tissutale.
• Specificità tissutale: altamente espressa nella cartilagine, nella placenta e in alcune linee cellulari tumorali o trasformate da virus. Nella cartilagine predominano le isoforme che utilizzano l'esone IIA o IIB, mentre nel tendine si trovano isoforme che utilizzano solo l'esone IIB.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'idrossilazione dei residui di prolina e lisina, la glicosilazione e la formazione di ponti disolfuro, processi fondamentali per la stabilità della tripla elica e l'assemblaggio sovramolecolare.
• Contiene ripetizioni collageniche (Gly-X-Y) e domini non collagenici; lo splicing alternativo genera molteplici isoforme che modulano finemente le interazioni con la matrice.
• Le varianti genetiche di COL11A1 sono associate alla sindrome di Stickler, alla sindrome di Marshall e alla perdita dell'udito non sindromica, sottolineandone il ruolo nello sviluppo oculare, uditivo e scheletrico.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 260–430 all'interno della regione a tripla elica, conservata tra le isoforme; la natura policlonale dell'anticorpo può consentire il riconoscimento sia delle varianti a lunghezza completa sia delle varianti sottoposte a splicing.
• Per il Western blotting, considerare un sistema di gel riducente o non riducente, poiché i ponti disolfuro presenti nei domini non collagenici possono influenzare la migrazione; il peso molecolare previsto è di circa 181 kDa, ma la migrazione effettiva può variare a causa delle modifiche post-traduzionali.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), metodi di recupero antigenico come la digestione enzimatica (ad esempio con pepsina) o il recupero indotto dal calore possono migliorare il rilevamento degli epitopi del collagene in sezioni di cartilagine incluse in paraffina.
• Per l'ELISA, si raccomandano titolazioni preliminari a scacchiera con COL11A1 ricombinante o estratti tissutali per stabilire le condizioni ottimali di rivestimento e rilevamento.
• Quando si lavora con campioni di roditori, è necessario convalidare inizialmente la reattività crociata a causa delle potenziali differenze nei pattern di espressione delle isoforme tra i tessuti umani, murini e di ratto.

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