Anticorpo policlonale di coniglio anti-COL2A1 per WB, ELISA - P28481

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di COL2A1

• La catena alfa-1 del collagene di tipo II (COL2A1), nota anche come collagene di tipo II alfa-1, è un collagene fibrillare principale e il collagene predominante nella cartilagine. È codificata dal gene Col2a1 nei topi e rappresenta la forma omotrimera del collagene di tipo II.
• Il collagene di tipo II è essenziale per il normale sviluppo embrionale dello scheletro, supportando la crescita lineare e fornendo la struttura portante che consente alla cartilagine di resistere alle forze di compressione, una proprietà critica per la funzione articolare e l'integrità dei tessuti.
• La proteina è un membro della superfamiglia dei collageni caratterizzata dal suo dominio a tripla elica composto da motivi ripetuti Gly-X-Y, dove X è spesso prolina e Y idrossiprolina, conferendo un'unica stabilità meccanica.
• COL2A1 viene secreto e localizzato nella matrice extracellulare dei tessuti cartilaginei, dove interagisce con altri componenti della matrice come i proteoglicani e i collageni minori per formare una rete altamente organizzata.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui idrossilazione, glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, sono critiche per la stabilità della tripla elica e l'assemblaggio in fibrille di collagene mature. La proteina lega anche il calcio, il che può influenzare la formazione delle fibrille e la mineralizzazione della matrice.
• La specificità tissutale è limitata alla cartilagine, rendendo COL2A1 un marcatore chiave per la differenziazione dei condrociti e la ricerca sulla biologia della cartilagine. Mutazioni o un'espressione aberrante sono collegate a displasie scheletriche e osteoartrosi.
• La proteina subisce splicing alternativo, generando isoforme che possono avere ruoli distinti nello sviluppo e nella malattia, sebbene la forma a lunghezza intera sia la più abbondante nella cartilagine sana.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli amminoacidi 1331-1487 della regione C-terminale di COL2A1 del topo, che può conferire reattività con la proteina nativa nei campioni di topo e ratto; si consiglia di verificare la specificità nelle specie di interesse.
• Per il Western blot (WB) in condizioni riducenti, è prevista una banda nell'intervallo di 132-142 kDa (circa 142 kDa previsti dalla sequenza del topo) nei lisati di cartilagine; si noti che il collagene di tipo II può formare oligomeri di ordine superiore, pertanto si consiglia di ottimizzare la preparazione del campione e i controlli di carico.
• Le prestazioni ELISA possono essere migliorate utilizzando la stessa proteina ricombinante come antigene di rivestimento; gli utenti dovrebbero validare la titolazione dell'anticorpo e le condizioni di rilevazione nel loro formato di saggio specifico.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, potrebbero verificarsi lievi variazioni da lotto a lotto; è consigliabile confermare la sensibilità e la reattività crociata in esperimenti pilota prima dell'uso su larga scala.

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