Anticorpo Policlonale Anti-COL4A4 per WB e ELISA - P53420

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del COL4A4

• La catena alfa-4(IV) del collagene, codificata dal gene COL4A4, è un importante componente strutturale del collagene di tipo IV, che forma una maglia a "rete di pollo" nelle membrane basali insieme alle laminine, ai proteoglicani e all'entactina/nidogen.
• Eterotrimeri di collagene di tipo IV sono costituiti da catene alfa; l'alfa-4(IV) si trova tipicamente in combinazione con le catene alfa-3(IV) e alfa-5(IV), formando reti essenziali in membrane basali specializzate.
• La proteina viene secreta nella matrice extracellulare ed è un componente costitutivo delle membrane basali glomerulari (GBM), svolgendo un ruolo strutturale critico nella filtrazione renale.
• La distribuzione tissutale è più elevata nel rene, calvaria, neuroretina e muscolo cardiaco; espressione inferiore nel cervello, polmone e timo; non rilevata nel fegato, pelle, ileo, pancreas o surrene (a livello proteico).
• Nell'occhio, il COL4A4 è espresso nella membrana di Bruch, nella membrana limitante interna, negli strati retinici e attorno ai vasi sanguigni, contribuendo all'integrità della membrana basale oculare.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'idrossilazione dei residui di prolina e lisina, la formazione di legami disolfuro e la glicosilazione, essenziali per la stabilità e la funzione del collagene.
• Le mutazioni nel COL4A4 sono associate alla sindrome di Alport, un disturbo genetico caratterizzato da malattia renale progressiva, perdita dell'udito e anomalie oculari.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione specifica (aa 1573-1690) del COL4A4 umano; considerare che l'anticorpo può riconoscere un epitopo lineare all'interno di questo dominio e potrebbe non rilevare isoforme che ne sono prive.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda principale di circa 164 kDa in lisati di tessuto renale o retinico umano; bande aggiuntive possono riflettere modifiche post-traduzionali o prodotti di degradazione.
• Nell'ELISA, ottimizzare la concentrazione di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo utilizzando un protocollo indiretto standard con proteina COL4A4 ricombinante o estratti tissutali; includere appropriati controlli negativi.
• Validare la reattività crociata con altri membri della famiglia dei collageni se necessario, poiché gli anticorpi policlonali possono mostrare reattività verso domini collagene conservati.

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