Anticorpo Policlonale Anti-COL4A5 per WB, IF/ICC, ELISA - P29400

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di COL4A5

• La catena alfa-5 del collagene di tipo IV svolge la funzione di componente strutturale principale delle membrane basali glomerulari (GBM), formando una rete a maglia ("chicken-wire") con laminine, proteoglicani e entactina/nidogeno.
• La proteina è secreta e si localizza nello spazio extracellulare, nella matrice extracellulare e nelle membrane basali.
• L'isoforma 2 mostra un'espressione tessuto-specifica nel rene.
• COL4A5 è implicato nella sindrome di Alport, una malattia genetica caratterizzata da insufficienza renale progressiva, sordità neurosensoriale e anomalie oculari.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali, tra cui idrossilazione e glicosilazione, e forma legami disolfuro.
• Contiene domini collagene ripetuti tipici dei collageni di tipo IV, che contribuiscono alla formazione di strutture a tripla elica.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 1462-1691) di COL4A5 umano, che si trova all'interno del dominio NC1. Questo dominio è coinvolto nell'assemblaggio dei promeri e può essere ben rappresentato negli estratti nativi di membrana basale.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 161 kDa. Utilizzare un gel di poliacrilammide a bassa percentuale (es. 6-8%) per facilitare il trasferimento di questa proteina ad alto peso molecolare, e valutare tempi di trasferimento prolungati.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, COL4A5 si localizza sulle membrane basali. Per una colorazione ottimale, utilizzare sezioni di tessuto congelate o fissate in paraffina. Per le sezioni in paraffina possono essere necessari metodi di recupero antigenico; consultare la letteratura per i protocolli specifici.
• Nelle applicazioni ELISA può essere utile utilizzare la proteina COL4A5 ricombinante o estratti di membrana basale come antigene di rivestimento. Convalidare la specificità dell'anticorpo con controlli positivi e negativi appropriati.

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