Anticorpo policlonale anti-COL9A1 per WB e ELISA - P20849

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di COL9A1

• COL9A1 codifica la catena alfa-1 del collagene di tipo IX, un collagene associato alle fibrille con eliche triple interrotte (FACIT) che è un componente strutturale della cartilagine ialina e del vitreo dell'occhio.
• Le molecole di collagene di tipo IX sono eterotrimeri costituiti dalle catene α1(IX), α2(IX) e α3(IX), e si associano alle fibrille di collagene di tipo II, contribuendo probabilmente all'integrità e all'organizzazione della matrice extracellulare.
• COL9A1 subisce splicing alternativo e contiene domini multipli, incluse regioni collageniche e non collageniche, essenziali per la sua interazione con altri componenti della matrice.
• La proteina è secreta e localizzata nello spazio extracellulare e nella matrice, dove partecipa all'assemblaggio e alla stabilizzazione delle strutture della cartilagine e del vitreo.
• Le modifiche post-traduzionali come l'idrossilazione, la glicosilazione e la formazione di ponti disolfuro sono critiche per la sua stabilità e funzione.
• Le mutazioni in COL9A1 sono associate a displasie scheletriche e disturbi del tessuto connettivo, inclusa la sindrome di Stickler (caratterizzata da anomalie oculari, uditive e articolari) e la displasia epifisaria multipla, evidenziando la sua rilevanza clinica.
• La proteina contiene un peptide segnale e siti di legame dello zinco, e la sua forma matura è una glicoproteina secreta.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo policlonale è una proteina ricombinante corrispondente agli aminoacidi 20–270 di COL9A1 umano, coprendo parte del dominio non collagenico N-terminale, che può fornire specificità per la catena α1(IX).
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 92 kDa per il COL9A1 a lunghezza intera in campioni di cartilagine o vitreo umano; tuttavia, a causa dello splicing alternativo e delle modifiche post-traduzionali, potrebbero essere osservate bande aggiuntive o spostamenti del peso molecolare.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con COL9A1 di ratto, suggerendo che può essere utilizzato in modelli di ratto; validare in lisati di tessuti pertinenti o sistemi ricombinanti per confermare la reattività.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo di COL9A1 ricombinante purificato come antigene di rivestimento o standard di cattura, ed eseguire un'ottimizzazione appropriata della diluzione dell'anticorpo e delle condizioni di rilevamento.
• Includere sempre controlli positivi appropriati (estratti di cartilagine, proteina ricombinante) e controlli negativi per confermare la specificità e minimizzare il background.

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