Anticorpo policlonale coniglio anti-Collagene I/COL1A1 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P02452

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del Collagene I/COL1A1

• La catena alfa-1(I) del collagene (COL1A1) è un componente principale del collagene di tipo I, il collagene fibrillare più abbondante nei vertebrati. Appartiene alla famiglia dei collageni di gruppo I.
• Il collagene di tipo I è un eterotrimero composto da due catene alfa-1(I) e una catena alfa-2(I), che forma l'elemento strutturale primario della matrice extracellulare (ECM) nei tessuti connettivi.
• La proteina viene secreta nello spazio extracellulare e depositata nella ECM, dove subisce ampie modifiche post-traduzionali, tra cui idrossilazione, glicosilazione e formazione di legami disolfuro, per assemblarsi in fibrille mature.
• La distribuzione tissutale è predominante nei tendini, nei legamenti e nelle ossa; nell'osso, le fibrille di collagene sono mineralizzate con idrossiapatite di calcio, fornendo resistenza alla trazione e integrità strutturale.
• Lo splicing alternativo e il processing proteolitico generano multiple isoforme; le mutazioni in COL1A1 sono associate a disturbi del tessuto connettivo come l'osteogenesi imperfetta, la sindrome di Ehlers-Danlos e alcune forme di nanismo.
• Ulteriori caratteristiche annotate includono il legame di metalli (calcio), residui fosforilati e una modifica con acido pirrolidone carbossilico all'estremità N-terminale, riflettendo una regolazione complessa della sua maturazione e funzione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che mappa i residui 1151–1250 del COL1A1 umano (NP_000079.2), una regione vicino al C-terminale. Questa progettazione potrebbe favorire il rilevamento del procollagene a lunghezza intera o delle catene di collagene maturo a seconda del trattamento del campione.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 139 kDa; le condizioni riducenti possono aiutare a risolvere i monomeri di collagene, mentre le condizioni non riducenti preservano gli oligomeri di ordine superiore. nei lisati tissutali, considerare un pretrattamento con collagenasi per confermare la specificità.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'istochimica immunologica (IHC-P), il collagene è prevalentemente extracellulare; potrebbe essere necessaria un'adeguata permeabilizzazione (es. Triton X-100) e il recupero dell'antigene (per sezioni paraffinate). La colorazione combinata con marcatori della ECM o il rilevamento in sezioni ossee decalcificate possono fornire una validazione aggiuntiva.
• Per le applicazioni ELISA, è possibile esplorare formati diretti o a sandwich. Il rivestimento con peptide o la cattura tramite un secondo anticorpo possono migliorare la sensibilità quando si lavora con matrici biologiche complesse come siero o estratti tissutali.

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